类及蛋白质测定.pptVIP

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  • 2017-01-30 发布于湖北
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(二)酶水解法 1.原理 样品经除去脂肪和可溶性糖类后,在淀粉酶的作用下,使淀粉水解为麦芽糖和低分子糊精,再用盐酸进一步水解为葡萄糖,然后按还原糖测定法测定其还原糖含量,并折算成淀粉含量。 2. 适用范围及特点 本方法不受半纤维素、多缩戊糖、果胶质等多糖的干扰,适合于这类多糖含量高的样品,分析结果准确可靠,但操作复杂费时。 3. 试剂 碘试剂、淀粉酶 4 测定方法 (1)样品处理 称样→脱脂→去可溶性糖→定容,过滤 (2)酶水解 滤液→糊化→冷却→加酶水解→验证水解程度→加热杀酶→冷却→转移定容→过滤 (3)酸水解 滤液→水浴回流水解1h →冷却→加甲基红→调pH值→转移定容 (4)测定 按还原糖测定方法进行。 5 结果计算 糊化 淀粉总量的测定 淀粉 淀粉溶液 直链淀粉和支链淀粉的线性及分支的水解片段 D-葡萄糖 显色 1.葡萄糖氧化酶 2.过氧化氢酶反应并发色 葡萄糖淀粉酶 α-淀粉酶 (三)旋光法 1 原理 淀粉具有旋光性,在一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度成正比。用氯化钙溶液提取淀粉,用氯化锡沉淀提取液中的蛋白质,测定旋光度,通过计算得淀粉含量。 2 应用范围及特点 本法适用于淀粉含量较高,而可溶性糖类含量很少的谷类样品,如面粉、米粉等。方法操作简便、快速。 2 测定方法 样品粉碎→称样→加水→加氯化钙提取→煮沸15min

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