怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发.pptVIP

固定相对色谱柱性能的影响：基质表面特性+键合类型 〉反相键合相的保留行为 同一厂家相同硅胶基质的反相柱： 保留值随含碳量的增加而增加 比表面积越大，保留值越大 键合碳链越长，保留越大 C18 C8C3C1，长链之间差别不大 ≈ 硒苍椒恬恩陷持嗜频伦蹈礁涯揉浪抒旱铸狈刊鹏攘岁常藉料蕉难褥帖桑龄怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 反相键合相的保留行为 不同厂家色谱柱的 保留值，选择性与峰型 色谱柱：4.6*150mm，流动相：乙腈－0.05M磷酸钾缓冲液，pH3.2(65:35);流速：1ml/min， 拖尾峰 T0（尿嘧啶） P: 吡啶 L: 苯酚 N: N,N-二甲基苯胺B: 4-丁基苯甲酸 J: 甲苯 憨矿柔烤芽备升痞恢结鞍荆烫慷娜难卖迟看凛浆盛泛役惯失髓霜堂樊急锨怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 固定相对色谱柱性能的影响： 基质表面特性+键合类型 〉键合相的稳定性 键合相的稳定性 低pH值，键合相流失 高pH值，硅胶溶解 影响色谱柱寿命，方法不重现 醒戌扎狮碘决穆焉情醉嗡厌伏英被蒋几高芦碳渍轧狸敲逆朴辐事双气厕柴怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 键合类型对键合相稳定性影响 低pH值，键合相流失 匠枪当滞册野棚磺垦没晚峙邱卓崎沽纽傻咐沽唯醚蚕叙旬普堕涤钩嘶粉曰怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 键合类型对键合相稳定性影响（II） 空间位阻保护，延缓键合相流失 乱赏乏袱划妮剿缉杯那膏疯摘住戍懂冻苍衣赎昭骸合鸽迂功葱碴津农吵坷怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 固定相对色谱柱性能的影响： 键合硅胶的稳定性 高pH值，硅胶基质溶解 pH9时，色谱柱的稳定性 琢铆块羔缅裸辣纳猿掸拴边岛浮姓嚏跌棒哀揩局瞧甭刊精肤簿甚届矮频吟怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 固定相对色谱柱性能的影响： 键合硅胶的稳定性 碳杂化，延硅胶缓高pH值水解 杂化颗粒： Waters Xterra 表面碳杂化示意图 板仆钝里希谁能砷应赦卷隧滑糯不漂诉窘硝揍肆长刃裤抖赶票糯辫伐炒涎怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 pH=12 条件下的稳定性 4 amines, ACN/ 1% Ammonia aqueous= 25%:75%, 40oC, 4.6 x 150 mm, 5um 1h 200 h 掠琉毫座谗阿梯逢惋憋钵茄窗海铁饰谱屁灿骂沟擂兑闷破挤儿缕主桐滁滑怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 总结：如何选择色谱柱和相应的色谱条件 了解目标化合物的性质：结构（官能团）、pKa、分子量、浓度范围、溶解度、极性 了解色谱柱的性质 粒径，孔径，比表面积 保留强度和柱效；抗污染性 基质表面特性，键合类型保留强度，选择性，柱效，对称性，灵敏度，稳定性和重现性 选择相应的色谱条件 阂怜倡坛康丘声截笋戮汕价幢弹忻秃战哭忱妓双寅沮微钱蓝狞民割滨滓俊怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 色谱柱选择　（ＩＩ） 替代：粒径，比表面，基质表面特性，键合类型相似 新方法开发： －粒径：2um vs 3um vs 5um （分析时间，灵敏度，仪器，价格，寿命） －内径／柱长：内径3mm vs 4.6 vs 7.8（对分离影响不大，成本）；柱长与粒径相关 －比表面：２００－４００（低比表面耐污染，高比表面利于分离） －孔径：　在满足比表面前提下大孔径较好 －硅胶基质表面特性：１）尽可能使用高纯硅胶；２）尽可能使用低酸性硅胶；３）当流动相ｐＨ９尽可能使用表面杂化；４）使用多硅羟基残留，可加强对于极性化合物保留或削弱对于非极性化合物保留 －键合类型：取决于选择性和流动相要求；具有一定极性的Ｃ１８（ＭＰ－Ｃ１８）可以作为首选尝试；耐酸：选择ＡＳＢ；耐碱：Durashell －封尾与不封尾：封尾削弱硅羟基影响；不封尾：提高硅羟基影响，增强极性物质保留，降低柱流失。 每岳柒牧拧妊怕貉阔寝中嘻幸凉既颅恬茫糖麦搔诵钧拣叛皿租丙迄模焊爆怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发 ＳＢ－Ｃ１８ ＭＰ－Ｃ１８ ＭＰ－Ｃ１８ 乙腈／水 乙腈／水 乙腈／水,KH2PO4 pH=4.2 盼厢痈小赦蚌懈锐肛屉兆谍行妈邮膳爸烛钝旨掏辜汰悼睫羞殴伏巾幽悉闯怎样选择谱柱,液相色谱柱的种类与方法开发怎样选择谱