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生物工艺原理期末考试 名词解释 下游过程：把生物反应液，如发酵液或酶反应液内有用物质分离出来，获得所需目标产品的生物物质的分离过程。 离心分离因素：离心加速度与重力加速度之比，可反映离心分离的效果，是代表离心设备分离能力的一项重要指标。。 高压匀浆法：属于液体剪切破碎方法之一，是借助于高压匀化作用的液体剪切作用使细胞破碎的方法。 喷雾干燥：是用雾化器将原料液分散成细小雾滴，并用热空气（或其他气体）与雾滴直接接触式进行干燥而获得粉粒状产品的一种干燥过程。 细胞破碎率：被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比数S=[(No-N)/No]×100 （No表示原始细胞数量，N表示经t时间操作后保留下来的未损伤完整细胞的数量） 热沉淀：在较高温度下，热稳定性差的蛋白质很容易发生性变，性变后的蛋白质溶解度很小，容易沉淀，利用这一现象，可根据蛋白质间的热稳定性的差别，进行蛋白质的选择性热沉淀，分离纯化热稳定性高的目标产品。 透析：是通过经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术 反渗透又称逆渗透，一种以为推动力，从中分离出溶剂的膜分离操作。因为它和自然渗透的方向相反，故称反渗透。根据各种物料的不同渗透压，就可以使大于渗透压的达到分离、提取、纯化和浓缩的目的。 ，等与某些阴离子状态的蛋白质形成复合物，使这种复合物的溶解度大大下降，但不影响其活性，有利于沉淀形成 膜分离过滤的基本方式： 死端过滤方式 错流过滤方式 死端/错流联合流程 工业生产中萃取操作的过程： 混合。料液和萃取剂充分混合形成具有很大比表面积的乳浊液，产物自料液转入萃取剂中； 分离。将乳浊液分离成萃取相和萃余相 溶剂回收。从萃取相有时也需从萃余相中分离出有机溶剂，并加以回收。 离子交换的基本步骤： 与交换离子从溶液主体穿过树脂颗粒表面的液膜向颗粒表面扩散； 从颗粒表面向颗粒内部扩散到交换位置； 发生交换反应 交换下来的离子从颗粒内部向颗粒表面扩散，至颗粒表面 穿过颗粒表面的液膜进入溶液 离子交换树脂的基本类型： 按树脂骨架的主要成分进行分类：如聚苯乙烯型树脂、聚丙烯酸型树脂、环氧氯丙烷型多乙烯多氨型树脂、酚---醛型树脂。 按骨架的物理结构分类，可分为凝胶型树脂、大网格树脂以及均孔树脂。 按火星集团分类，分为含酸性基团的阳离子交换树脂和含碱性基团的阴离子交换树脂。按国标，合成离子交换树脂按官能团的性质分为强酸、弱酸、强碱、螯合、两性及氧化还原七大类。 重组蛋白的体外折叠： 重组蛋白的体外折叠是指采用适当的条件使伸展的重组变性蛋白重新折叠成可溶解性的具有生物活性的蛋白质。体外折叠实验表明，折叠过程可能包括：1.分子内部疏水区域的聚集，2.形成部分的二级结构作为后续折叠的骨架；3.形成共价键以稳定蛋白质构象。 溶液结晶方法的类型： 按结晶方法分为 蒸发结晶、冷却结晶、其他结晶 蒸发结晶：通过蒸发溶剂使浓缩溶液进入过饱和区起晶，并不断蒸发以维持溶液在一定的过饱和度进行育晶。 冷却结晶：采用降温使溶液进入饱和结晶区结晶，并不断降温，以维持溶液一定的过饱和度进行育晶，常用于温度对溶解度影响比较大的物质结晶。 论述题 论述生物产物分离纯化工工艺设计的原则和影响因素： 原则： 1.技术路线、工艺流程尽量简单化； 2.尽可能采用低成本的材料和设备； 3.将完整工艺流程划分为不同的工序； 4.注意时效性，应优选可缩短各工序纯化时间的加工条件； 5.采用成熟技术和可靠设备； 6.以适宜的方法检测纯化过程、产物产量和活性，对纯化过程进行监控； 因素： 1.抑制细胞或分泌产物中分解酶的活性，防止其消化降解待提纯产物以保持其生物活性； 2去除细胞或分泌产物中非目标产物成分，同时应尽量较高的目标产物成分的回收率。对于生物药物制品，非目标成分对于拟提纯的目标成分来说是杂质成分，如外源蛋白和多肽等可引起过敏反应，而脂多糖可导致发热等，对人体可能是有害的物质。 3.优化选择和组合各种分离纯化技术方法以达到最佳提纯效果。 4、对分离纯化过程选用适宜的技术检测手段进行质量监控； 5.对分离纯化工艺以及所用的分离纯化介质、设备进行验证。 试比较细胞破碎技术中机械法和非机械法的优缺点： 机械方法破碎细胞效率高，但也存在一定的缺陷：1.能耗很高，能量利用率很低，并且产生高温和高的剪切力，易使不稳定产品失活；2.非专一地释放产物，导致液相中成分复杂，给后续的分离提纯技术带来困难；3.产生的细胞碎片微粒尺寸分布范围宽，大量细颗粒增加了固液分离的难度。 非机械法的优点：1.对产物释出具有一定的选择性。2.细胞外形保持完整，碎片少，有利于后续分离。3.核酸释出