mIg免疫荧光实验开题报告.pptVIP

） 组员： 赵涛（1320151021） 王枭（1320151022） 黄敏（1320151023） 母利（1320151024） 王权皓（1320151025） 临床K-10班第四小组 2015年4月21日 1、掌握免疫荧光标记技术直接法的原理和操作方法； 2、熟悉荧光显微镜的使用方法。 B淋巴细胞表面携带的mIg，为B细胞特异性的表面标记，能与相应的特异性抗体结合，故可用荧光标记的抗Ig血清进行免疫荧光染色镜检。由于B细胞在分化过程中的每个阶段均具有mIg的标记 ，故该法课检出全部B淋巴细胞。每一B细胞的mIg（IgE、IgA、IgM、IgD、IgG）不同，分别可以用荧光标记的抗Ig单克隆抗体染色，则可鉴别带不同类Ig的B淋巴细胞。能与荧光标记抗体结合的细胞，在荧光显微镜下细胞膜可呈现荧光，即为mIg阳性细胞，也就是B淋巴细胞。同时用普通光源照明，计数该视野内的淋巴总数，根据发荧光和不发荧光的计数，就可以算出B细胞的百分比。 材料 1、FITC（异硫氰酸荧光素）标记的羊抗人IgM 2、受检者静脉抗凝血 3、RPMI 1640完全培养液 4、5%胎牛血清 Hank’s液 5、淋巴细胞分离液（比重1.077±0.001） 6、0.2%台盼蓝染液 7、清洁载玻片、盖玻片、血球计数板、 计数器、毛细吸管、试管、显微镜 操作