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项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体的制备) 过程 用途 第一步:原生质体的制备;第二步:原生质体的融合;第三步:杂种细胞的筛选与培养;第四步:杂种植株的诱导与鉴定 第一步:细胞培养;第二步:诱导细胞融合;第三步:某种细胞选择;第四步:杂种细胞克隆与纯化 克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了杂交亲本的组合范围 ①作为诊断试剂;②用于治疗疾病和运载药物,如“生物导弹” * 跟踪训练 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答: (1)利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体,常用聚乙二醇、____________、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行___________和__________,经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 灭活的病毒 体外培养 抗体检测 * (2)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,请完成设计方案: ①取________________________细胞的细胞核,移植到去核的________________细胞中,构成重组细胞。 ②将重组细胞在________条件下做大规模培养或注射到小鼠________内增殖,以获得大量单克隆抗体。 特定抗原刺激的B淋巴 无限增殖 体外 腹腔 * (3)也有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。 ①酶A是指__________________,酶B是指______________。 ②图中Ⅰ表示_________________________________,对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是________________________________, Ⅲ所指的细胞具有的特点是______________________________________。 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 目的基因(无限增殖调控基因或prG) 检测目的基因是否导入和是否表达 既能无限增殖,又能产生特定抗体 * 栏目导引 网格构建 知识自填 核心考点 重难突破 专题九 现代生物技术专题 栏目导引 网格构建 知识自填 核心考点 重难突破 专题九 现代生物技术专题 * 第1讲 基因工程和细胞工程 * 考纲要求 三年考情 命题趋势 1.基因工程的诞生Ⅰ 2.基因工程的原理及技术Ⅱ 3.基因工程的应用Ⅱ 4.蛋白质工程Ⅰ 2013全国大纲、广东、江苏、安徽、四川、福建、全国Ⅰ 2012全国新课标、山东、江苏、福建、天津、浙江、安徽 2011浙江、海南、山东、江苏、安徽、福建、北京 1.趋势分析:(1)多以最新基因工程研究成果为载体,考查基因工程的工具与操作程序。 (2)以工农业生产、畜牧业生产和医学实践中的具体事例为命题背景,考查植物组织培养相关知识。 2.备考指南:(1)表解比较法理解限制酶、DNA连接酶和载体的作用。 (2)实例分析法理解基因工程的原理与过程。 (3)列表比较法理解两个不同:植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。 (4)图解法理解单克隆抗体的制备过程。 植物的组织培养Ⅱ 2013重庆、全国大纲、全国Ⅱ、天津 2012浙江 2011江苏 1.动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ 2.细胞融合与单克隆抗体Ⅱ 2013重庆、全国大纲、山东 2012山东、福建、安徽 2011江苏、安徽 * 限制酶 载体 基因表达载体的构建 目的基因的检测和鉴定 转基因动物 基因治疗 基因 可产生自然界没有的蛋白质 细胞的全能性 植物体细胞杂交 作物新品种的培育 细胞增殖 动物细胞核的全能性 细胞膜的流动性 给小鼠注射特定抗原 产生专一抗体的杂交瘤细胞 * 1.基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶? 基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶,克隆技术的工具酶是纤维素酶、果胶酶和胰蛋白酶。 2.转基因动物的培育涉及到哪些生物工程? 基因工程、动物细胞工程和胚胎移植。 * 考点一 基因工程 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是( ) * A.图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后,含有4个游离的磷酸基团 B.在构建重组质粒时,可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割质粒和外源DNA C.用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切,加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒 D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长 * [自主尝试] ________ 【解析】图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后,会破坏两个磷酸二酯键,磷酸二酯键是由相邻脱氧核苷酸的磷酸基团和脱氧核糖脱水形成的,因此
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