实验四 包埋法固定SO.pptVIP

实验十五：包埋法固定SOD及固定化酶性质测定 一、实验目的要求 了解酶的固定方法及其应用 掌握包埋法制备固定酶的操作方法 固定化酶的应用 酶经过固定化后，比较能耐受温度及pH值的变化，可制成机械性能好的颗粒装成酶柱用于连续生产，也可以制成酶膜、酶管等多种形式的酶反应器。 固定化酶作为生物催化剂主 要用于生产精细的特殊化学品、药品，在食品工业中由于生物催化剂较化学催化剂安全，也将得到广泛使用。同时，固定化酶用于各种疾病的诊断、治疗及人工脏 器；用作化学分析的酶电极；固定化酶用作燃料电池；固定化酶用作亲和层析手段，分离和提纯酶的底物、辅酶、抑制剂及抗体等，显示出广阔的前景。 本实验是用一定浓度的聚丙烯酰胺作为包埋剂，将SOD包埋在多孔的网状结构的聚丙烯酰胺凝胶内而制成固定化酶。 SOD活力计算： 对照OD值-样品OD值 SOD活力(U/ml)＝ x稀释倍数 对照OD值*50％ （每毫升反应液中SOD抑制率达50%时所对应的SOD量为一个SOD活力单位） 2.球状固定化酶的制备：用取样器吸取50μL ，分别滴加到白瓷板的20个孔中，待凝胶聚合。 3.冲洗凝胶表面未固定化的SOD酶。 用蒸馏水洗涤球状固定化酶3-5次。 4.固定化酶活性测定：采用黄嘌呤氧化法测定SOD活