张易祥_微生物遗传学实验材料.pptVIP

实验八 微生物遗传实验 ----抗药性突变株的分离 一 实验目的 掌握微生物变异的原理 了解紫外线诱变筛选突变菌株的方法 学习用梯度平板法分离抗药性突变株 二 实验原理 基因突变可分为自发突变和诱发突变。许多物理、化学、生物因素对微生物都有诱变作用。 1、自发突变---（抗药性突变） 1）基因中碱基顺序的改变可导致微生物细胞的遗传变异。这种变异有时能使细胞在有害的环境中存活下来，抗药性突变就是一个例子。 2）微生物的抗药性突变是DNA分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是引发突变的诱导物。 3）因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变的细胞会在平板上生成菌落。 4）将这些菌落挑取纯化，进一步进行抗性试验，就可以得到所需要的抗药性菌株。 5）抗药性突变常用作遗传标记，因而掌握分离抗药性突变株的方法是非常重要的。 6）为了便于选择适当的药物浓度，分离抗药性突变株常用梯度平板法。本实验用梯度平板法分离大肠杆菌抗氨苄青霉素突变株。 2、紫外线诱发突变 紫外线是一种常用的物理诱变因素，主要作用于DNA，引起DNA损伤； 为避免光修复，处理后的微生物应放暗处培养。 三 实验步骤 1、抗药性菌株的筛选(p.167) （1）取一个已经灭菌的空大平皿，把培养皿斜放(一边垫起)，在无