PCR技术的原理,β-actin基因.pptVIP

β-actin基因的作用 PCR技术的原理 PCR的定义 PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。 PCR的历史及应用 PCR是1985年美国Cetus公司人类遗传部、加利福尼亚大学Los Angeles和Hoghes医学院等联合创建的一项生物技术。这项技术被广泛应用于检测核苷酸变异和染色体重排、高效克隆某一基因片段、线粒体和基因组DNA的直接测序以及细菌、病毒、寄生虫所致疾病的诊断，在分子生物学、医学、生物工程、法医学、考古学等许多领域都有重要的实际应用价值。 PCR的原理 类似于天然DNA的复制，主要利用DNA聚合酶，依赖DNA模板的特性，模仿体内的复制过程，在附加的一对引物（人工合成的寡核苷酸片段，它与待扩增片段两条链的两端DNA序列分别互补）之间引发聚合酶链反应。 PCR全过程基于一套“三部曲” ①DNA模板的变性： ②与附加引物退火： ③引物延伸（扩增步骤）： β-actin 即β肌动蛋白，是actin家族的一员,在维持细胞结构,细胞内运动,细胞分裂等细胞生理活动方面发挥着重要的作用，它是管家基因中的一种。 管家基因(house-keeping genes) 是指所有细胞中均要表达的一类基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。例如β-actin、GAPDH等 β-actin在PCR中起着什么作用 在进行半定量PCR时，选择管家基因可以通过计算目的基因和内参的比值，得到基因表达的相对浓度。 Thank you~