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* 纯物理学方法:库尔特仪器(电阻法为经典方法)、雅培(激光+流式细胞技术); 物理、细胞化学方法相结合:拜耳ADVIA120(激光+过氧化酶法); 物理、核酸荧光染色方法:SYSMEX SE-9000、XE-2100。 由于结合了细胞化学及核酸荧光染色的方法,在分类时对激光强度的要求不再很高,使得紧凑经济的半导体激光的运用成为可能。 * 部分仪器由于使用了专门的幼稚细胞通道及试剂,从而不仅可提示不成熟粒细胞的存在,而且还能将其准确计数,敏感度可达到1%左右。 * 在幼稚细胞检测中得到的HPC信息可以应用到干细胞移植中,提示干细胞采集的最佳时机,且较流式细胞仪速度快、成本低,可短时间内重复多次采血检测。 * * 网织红细胞(下称网红)是反映骨髓造血功能的重要指标,迄今国内仍多采用显微镜目测法,但操作费工费时,受主观因素影响,计数精确性较差为其不足,近年来,国外多使用自动分析仪代替目测法,无论从实验方法学还是临床应用,均取得了良好效果.新型的五分类仪器都具备全自动网织红细胞分析功能,有的还可将网织红细胞做进一步的成熟度分类,为临床评价红细胞生成功能提供准确的参数。 * * 有核红细胞的存在将直接影响白细胞的分类及计数结果,通过核酸染色与激光检测相结合的方法不仅能检测出血液中有核红细胞的存在及数量从而判断红细胞生成功能,同时还能得到更加准确的白细胞信息,提高检验准确性。 * * 大多数五分类血球计数仪都使用一种方法检测血小板,如库尔特(电阻法)、拜耳(激光法),由于方法单一,在血小板出现形态异常时造成较大误差;使用两种方法检测血小板的有雅培CD-4000,除了使用激光法外增加了CD-60单克隆抗体检测血小板,另外SYSMEX XE-2100在阻抗法检测血小板的同时增加了核酸荧光染色方法,进一步区分出血小板及红细胞、白细胞碎片,从而得到准确的血小板计数。 * * 五分类血细胞分析仪最新进展 西南医院 府伟灵 二00二年三月 血细胞分析仪的概念 分析外周血细胞的仪器 分析对象以外周血中成熟细胞(红细胞、白细胞、血小板)为主 不同发展水平的产品 白细胞二分类 三分类 五分类。。 模块式自动化。。。。 五分类+推/染片机+读片机 单机自动化:筛选 五分类血细胞分析仪的发展 五分类仪器的发展概要 完善对成熟细胞分析的方法学 – EO/BA、血小板 检测幼稚细胞 第一代:EO、BA分析 第二代:RETIC分析(全自动、分类) 第三代:其他幼稚细胞分析(NRBC、幼稚 白细胞);血小板双方法 网络功能、扩展功能 第三代五分类血液分析仪开发概念 网络时代的产品:多媒体功能、数据处理、远程诊断、在线质控 处理速度快,筛选能力强 解决第二代五分类所不能解决的问题 血小板准确性 幼稚细胞检测 有核红细胞检测 白细胞五项分类技术 方法学 物理(激光、射频、电阻) 细胞化学(细胞染色) 物理-分子生物学技术(核酸荧光染色) 第三代物理光源:半导体激光 寿命长:7 - 10年 体积小 对稳压要求低 更为经济 半导体激光的流式细胞术 侧向荧光(RNA/DNA含量) 激光 (波长633nm) 侧向散射 (细胞内部结构,如核的大小) 前向散射光 (细胞大小) 白细胞五项分类技术 核酸染料Polymethine(多次甲基)的作用: IG:准确的未成熟粒细胞 OTHER:异常淋巴、原粒细胞 更准确的WBC分类结果 新的血液学信息 IG-不成熟粒细胞。 可精确计数不成熟粒细胞。 Aty Lymph Blast Immature Gran Blast RF DC RBC ghost HPC HPC应用于PBSCT 与CD-34, CFU有良好的相关性 分析时间仅40秒,不需前处理 PLT Clump IMI检测通道 单独通道和试剂 幼稚细胞检测 ——专用检测通道和专用试剂 HPC 用于末梢血干细胞移植 Immature Gran Blast RF DC RBC ghost HPC 和CD-34+细胞良好的相关性, 无需任何前处理,只需40秒检测时间 即得知捕获末梢血干细胞 的最佳时间 PLT Clump IG 精确测定未成熟粒细胞 Fluorescence(RNA): Polymethine oxazine染料 Forward Scatter(Volume) MFR HFR LFR PLT RBC-O RET WBC IRF 全自动RET检测 ——DNA、RNA染色 IRF 用于检测红细胞生成 前向散射光 (体积) MFR HFR LFR PLT-O RBC-O RET WBC IRF 未成熟网织红细胞
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