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植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 细胞融合 植物体细胞杂交和动物细胞融合得比较 * 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞工程: 植物细胞工程: 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.单克隆抗体 4.胚胎移植 5.核移植 1.过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬液 细胞株 细胞系 细胞增值 无限传代 去掉组织间 蛋白 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 细胞贴壁 原代培养 传代培养 胰蛋白酶 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 如何界定原代培养和传代培养? 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖 遗传物质改变 动物细胞培养条件 1。无菌、无毒 2。营养:葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素和动物血清等。 3。温度:36.5+0.5 4。PH=7.2~7.4 5。气体环境:O2和CO2(95%空气+5%CO2) 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 动物体细胞核移植和克隆动物 分为胚胎核移植和体细胞核移植 1.过程: 诱导方式 物理法 化学法 生物法: 灭活的病毒 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 (不感染细胞) 保留融合活性 (诱导细胞融合) 1.过程: 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂种细胞 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 1.其由何种细胞产生? 2.主要分布在哪里? 3.如何得到抗体? 提问 ? 抗体 1。抗原 动物体内 刺激 效应B 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一效应B细胞 不能增值,产生大量抗体 2。特异性差、纯度低; 产量低、反应不够灵敏 设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖 -化学性质单一、特异性强的抗体。 杂种细胞 ? ? 诱导其融合的方法有哪些? 抗原 效应 B细胞 2.制备过程: ? ? 抗原 效应 B细胞 筛选 筛选 AA型、BB型 AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 杂交瘤细胞 3.单克隆抗体的应用: ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面,具有 特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹 一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞 灭活病毒 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势 多莉与“母亲” 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 克隆动物的研究意义 1.用于生物学和医学研究的实验动物 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病 4..保护濒危动物 6.世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题: 黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊卵 腺细胞核 重组细胞 早期胚胎 另一头母绵羊子宫 克隆绵羊多莉 a b 电脉冲处理 妊娠、出生 ⑴写出 a、b所指的细胞工程各称:a b 。 ⑵实施细胞工程a时,所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是: 。 ⑶多莉面部的毛色是 ,判断依据: 。 ⑷继植物组织培养之后,克隆绵羊培育成功,证明动物细胞也具有 。 ⑸请举例说明克隆绵羊培育成功的实际意义: 。 动物的胚胎移植 解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓疤细胞融合的是( )
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