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2017整理体外抗体形成细胞的检测

体外抗体形成细胞的检测定量溶血分光光度计法 Quantitative Hemolytic Spectrophotometric determination （QHS） SRBC免疫小鼠获取小鼠脾细胞 SRBC (Ag) + spleen cell (Ab) +Complement MAC 裂解SRBC 释放出血红蛋白分光光度计定量测定 SRBC制备以NS洗涤防凝SRBC两次以 NS稀释成1.5×108/ml Complement制备豚鼠血清 (5) + SRBC (1) 4℃吸收 30 min 3000rpm离心15min，上清 1:10 稀释备用脾细胞制备 2×107/ml 脾细胞 (见步骤) 脾细胞的制备 SRBC免疫小鼠 4天后拉颈处死，取脾 200目铜网上研磨脾脏，收集脾细胞悬液 2000rpm离心5min，弃上清加4.5 ml DDW，振荡45秒,加入0.5ml 9%NaCL, 2000rpm 离心 5min,弃上清（加5ml Hank’s 液，混匀 2000rpm 离心 5min，弃上清）加 1 ml Hank’s 液 (计数，调整细胞浓度为2×107/ml) 混匀，37℃ 孵育 1 h 3000rpm 离心 5 min，取上清 721分光光度计测413nm处OD值（Hb量） * Principle SRBC B anti-SRBC Ab IMMUNIZE MOUSE SRBC COMPLEMENT Procedure Procedure Procedure 1 ml 1 ml Complement 1 ml 1 ml SRBC 1 ml Hank’s 液 1 ml 脾细胞对照管实验管抗体形成细胞检测 W W W W 1mm *