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- 2017-02-02 发布于上海
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层析分离方法
概 述
■ 层析法――是一种使不同分子相互分离的过程,当一混合样品被导入一固定相的支持体中,而另一流体(移动相)通过时,由于样品各组分与固定相和移动相相互作用的大小不同,使各组分通过固定相支持体的速率不同而得分离。
层析法的特点:能分离一系列结构较为相似的成分,以达到一般分离方法难以达到的目的。
■ 层析常见种类及用途:
a.柱层析――分离量较大,主要用于分离制备;
b.薄层层析――主要用于分析鉴定,也可用于半微量制备。
c.纸层析――主要用于分析鉴定,也可用于半微量制备。
■ 层析法按分离原理大体上又可以分为
(1) 吸附层析(利用吸附能力的差别进行分离),常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等;
(2) 分配层析(利用在二种不互溶的溶剂中分配比不同进行分离),常用的支持剂为硅胶、硅藻土、纤维粉等,反相硅胶(键合硅胶)、液滴逆流层析则是分配层析与逆流分溶的发展;
(3) 离子交换层析(利用离子解离强度不同进行分离),常用的离子交换树脂有强酸性(磺酸型)、强碱性(季胺型)、弱酸性(羧酸型)、弱碱性(三级胺型);
(4) 电泳(利用电流通过时,离子趋电性不同进行分离),常用的有纸电泳、琼脂电泳、凝胶电泳。
(5) 其他有气体层析、凝胶层析、亲和层析等,
■ 层析方法的选择:
非极性的成分常选择氧化铝或硅胶吸附层析;
极性较大则采用分配层析或弱吸附剂吸附层析;
酸性、
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