第七章遗传与育种幻灯片.ppt

六、遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式 （一）核酸存在的七个水平及质粒 细胞水平：存在于细胞核或核质体，单核或多核 细胞核水平: 原与真核生物的细胞核结构不同，核外DNA 染色体水平: 倍性(真核)和染色体数 核酸水平：在原核中同染色体水平、存在部分二倍体 DNA或RNA，复合或裸露，双链或单链 基因水平：具自主复制能力的遗传功能单位，长度与信息量，转录——翻译 密码子水平：信息单位,起始和终止, 核苷酸水平：突变或交换单位，四种碱基 4、突变自发性的证实 波动实验 涂布实验 影印培养 5、自发突变的机制 从本质上讲，突变是理化因子作用于DNA，使其结构发生变化并最终改变遗传性状的过程。 （1） 光修复 也称光复合作用，只作用于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体的修复。 由光复合酶来完成修复，发生在DNA复制之前。 光复合酶存在细菌低等真核生物，鸟类甚至人类白细胞中。此酶在暗处不起作用。 大肠杆菌的光复合酶由471个氨基酸组成，分子量为35kD，是由phr基因编码。 （2）、切除修复（暗修复） 机制：特异性酶识别DNA链中的损伤部位；DNA损伤部分被切除；在DNA聚合酶Ⅰ和连接酶的作用下完成修复。发生在DNA复制之前。 1、原核生物的基因重组 转化 转导 接合 （1）转化 定义：给体细胞的研碎物中的DNA片段直接吸收进活的受体细胞的基因重组方式。 首先在肺炎双球菌中发现。 自然转化 定义：不经特殊处理的细菌细胞从其环境中吸收外来DNA的过程称为自然转化。革兰氏阳性细菌和阴性细菌都能进行自然转化。 自然转化可分为三个阶段： 感受态的出现、 DNA的结合与进入、 DNA的整合。 决定转化效率的内在因素 受体细胞的感受态 受体细胞的限制系统 供体与受体DNA的同源性 人工转化 通过二价阳离子处理，大肠杆菌和许多G-细菌能产生感受态；可通过制备原生质体对G+实现DNA转化。 （2）转导 定义：通过缺陷噬菌体为媒介，把供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象。 普遍性转导噬菌体 许多温和噬菌体和烈性噬菌体可作为普遍性转导噬菌体。 鼠伤寒沙门菌P22和大肠杆菌P1是普遍性转导噬菌体，这两种噬菌体既能溶源又能裂解。 局限性转导 只能使供体的一个或少数几个基因转移到受体的转导作用称为局限性转导。 温和噬菌体参加局限性转导：λ噬菌体、Φ80噬菌体和P2噬菌体。 （3）接合作用 定义：是供体和受体细胞直接接触后，质粒（称接合质粒、自主转移质粒或性质粒）从供体向受体细胞转移的过程。 接合现象的发现与证实 1946年，LederbergTatum用大肠杆菌中K12的两个缺陷型菌株A（bio-met-thr+leu+）和B （bio+met+thr-leu-）在完全培养基上混合过夜，涂布于基本培养基上出现重组体原养型菌落，出现的频率为10-5～10-6，其基因为 bio+met+thr+leu+。 F质粒 F质粒发现：Hayes发现失去可育性的A菌株若与可育的A菌株一起繁殖，分离后与B菌株杂交，结果不育的变种恢复了可育性。 F质粒与接合作用 F+ × F-杂交：其结果是受体和供体都成为F+细胞。 Hfr × F-杂交：其结果仍是Hfr和 F-细胞。转移的顺序是F因子的oriT和小部分FDNA先进入受体，然后是染色体DNA，最后是剩下的大部分F因子DNA。 F′ × F-杂交：能专一性向F-转移F′质粒携带的供体基因。通过F′因子转移而使受体改变其遗传性状的现象称为F遗传转导或性因子转导。 （2）、真菌的准性杂交（准性生殖） 准性杂交是真菌的一种导致重组的过程，包括异核体的形成、二倍体的形成、体细胞交换和单元化。 准性杂交具有普遍性：许多真菌中均存在准性生殖。 准性生殖过程： 异核体的形成：并存两种或两种以上不同遗传型的细胞核的细胞或菌丝称为异核体。 异核体的证实：A、互养的排除：若原养型菌落的出现是由于互养所致，则单个菌丝尖端就不会生长。B、二倍体或单倍体的排除：异核体产生的孢子在基本培养基上不生长；而二倍体或重组单倍体均能在基本培养基上生长。 1、基因工程的主要过程： 目的基因获得、载体的选择与准备、目的基因与载体连接成重组DNA、重组体的筛选。 2、基因工程的应用 生产药物：治疗用药物、疫苗、单克隆抗体及诊断试剂 改造传统发酵菌种 动、植物特性的基因工程改良 在环境保护中的应用 遗传物质是单向转移的： 用正反杂交实验说明两菌株所起的作用不同，大肠杆菌的遗传重组是一种单向过程。其中供体菌株又称为雄性细胞；受体菌株又称为雌性细胞。 F因子是染色体外的一种遗传结构，可自我复