革兰氏染色技术(底版改动)全解.ppt

革兰氏染色方法 （一）实验目的 （二）实验原理 （三）实验器材 （四）实验方法 （五）实验作业 （六）注意事项 革兰氏染色法：是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。 G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的脂质类，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。 G+菌细胞壁中肽聚糖层厚含量多且交联度高，脂质类含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。 1、活材料：培养3日的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。 2、染色液和试剂：结晶紫、稀碘液、95%酒精、沙黄（番红）、蒸馏水、二甲苯、香柏油。 3、器材：废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、吸水纸、擦镜纸、显微镜。 （四）操作方法 （1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片中央取一环蒸馏水，按无菌操作法取大肠杆菌涂片，做成浓菌液，注意取菌不要太多。 （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。 （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。