第4章核酸化学分解.ppt

第四章 核酸 一、核酸的研究历史和重要性 1944年（1877-1955），美国O.T.Avery(艾弗里）等人发表了脱氧核糖型的核酸是III型肺炎球菌转化要素的基本单位即DNA是细菌的转化因子，第一次证明了DNA是遗传物质。 著名的肺炎双球菌转化实验 Avery的转化试验：（1944年） 我是世界上第一个手拿试管基因的人。 Avery没有获得诺贝尔奖金的原因： 蛋白质是遗传物质的观念根深蒂固 提取的核酸中仍然有少量蛋白质污染 Avery不善于宣传自己和争辩 Avery去世过早 1953年 Watson和Crick提出DNA结构的双螺旋模型——真正“核酸时代”的到来。 1958年——Crick提出遗传信息传递的中心法则。 1961年——Jacob（雅各布 ） and Monod(莫诺)提出操纵子学说。 1965年——Holley R.W.等提出酵母丙氨酸tRNA的完整序列（一级结构）。 1966年 ——经过H. Gobind Khorana等多位美国生物化学家的努力，在以往基础上，破译出了其他氨基酸的遗传密码子，至此组成蛋白质的20种氨基酸的全部遗传密码被确定。 1970年——美国分子病毒学家，Baltimore D.（D.巴尔的摩），Temin H.M.（H.M.特明）和Mizutani S.，两个组各自独立地从鸡肉瘤病毒中发现了RNA逆转录酶，揭示了生物信息传递中存在着由RNA形成DNA的过程，发展和完善了中心法则。 1972 -1973 年 Berg成功进行DNA体外重组cohen创建分子克隆技术，在体外构建具有生物学功能的细菌质粒。 1975年——sanger(桑格尔）建立了分析 DNA碱基序列的方法。 80年代 分子生物学、分子遗传学等学科突飞猛进发展。 1985年——美国生物化学家Mullis Kary（K.穆利斯）成功发明聚合酶链式反应技术（PCR）。该技术可从极其微量的生物样品中大量扩增DNA分子，使基因工程获得了一个新的有力工具。 90年代以后 实施人类基因组计划（HGP）,生命科学进入一个新时代. 1997年Wilmut（维尔穆特）等人首次不经过受精，用成年羊的体细胞的遗传物质，成功获得了克隆羊——多莉。 二、核酸的概念 （1）核酸是（线性大分子）生命的物质基础存在一切活细胞中。 （2）核酸是遗传信息的载体。 （3）核酸是参与蛋白质合成的重要物质。 （4）核酸是单核苷酸聚合成的多核苷酸链。 三、核酸分类和分布 口诀 DNA在核里 ， 遗传信息它控制； RNA多在浆 ， 合成蛋白传信息； mRNA为模板 ， tRNA作载体； rRNA是车间 ， 三者分工又统一； 第一节 一、元素组成: ?组成核酸的元素有C、H、O、N、P等. ?与蛋白质比较，其组成上有两个特点：一是核酸一般不含元素S，二是核酸中P元素的含量较多并且恒定，约占9～10%。因此，核酸定量测定的经典方法，是以测定P含量来代表核酸量。 二、分子组成与基本单位 1.核酸的水解产物——核酸经水解可得到很多的单核苷酸，因此核苷酸是核酸的基本单位。 核苷酸可被水解产生核苷和磷酸； 核苷还可再进一步水解，产生戊糖和含氮碱基。 2.基本碱基结构和命名 （1）碱基组成特点： ①核苷酸中的碱基均为含氮杂环化合物，它们分别属于嘌呤衍生物和嘧啶衍生物 ②核苷酸中 嘌呤碱(purine)主要是鸟嘌呤(guanine,G)和腺嘌呤(adenine,A)； 嘧啶碱(pyrimidine)主要是胞嘧啶(cytosine,C)、尿嘧啶(uracil,U)和胸腺嘧啶(thymine,T)。 ③DNA和RNA都含有鸟嘌呤(G)、腺嘌呤(A)和胞嘧啶(C)； 胸腺嘧啶(T)一般而言只存在于DNA中，不存在于RNA中； 尿嘧啶(U)只存在于RNA中，不存在于DNA中。 （2）嘧啶碱基 (3）嘌呤碱基 （4）核酸中五种碱基中凡含有酮基的，在溶液中发生酮式一烯醇式互变异构现象。这种互变异构在基因的突变和生物的进化中具有重要作用。 （5）稀有碱基 　　 稀有碱基（或修饰碱基），是在核酸合成以后由常见嘌呤碱或嘧啶碱在不同部位进行甲基化或其它的化学基团酶促修饰衍生而成的，一般在核酸中的含量稀少。 生物体内还有一些游离的嘌呤碱基（黄嘌呤、次黄嘌呤）是代谢的中间产物。 DNA中的修饰碱基如：5-甲基胞嘧啶（m5C），5-羟甲基胞嘧啶（hm5C）；5，6-二氢尿嘧啶（DHU)等。 RNA中以tRNA含修饰碱基最多，如：1-甲基腺嘌呤（m1A），7一甲基鸟嘌呤（m7G） 常见的几种稀有碱基 （6） 碱基的紫外吸收 　　 嘌呤和嘧啶