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植物病害标本采集制作和鉴定
实训十、植物病害标本采集、制作和鉴定
一、目的要求
通过采集和制作标本,了解植物病害标本采集要求,学会标本的采集与记录,掌握植物病害标本的制作方法,进一步巩固病害知识,每人抽签完成1份病害标本。
二、材料和用具 标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、枝剪、手锯、标本缸、酵酸铜、硫酸铜、95%乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馏水等。
三、内容与方法
(一) 病害标本的采集
1 标本采集基本要求
采集完整的标本,最好是先摄影然后再压制或浸渍保存,拍照越清晰越好,要求拍正常植株和病害部位。每号标本,样本数量应至少采集2-3份。
2 取样部位
(1)标本上有子实体的应尽量在老叶上采集
因为它比较成熟,许多真菌有性阶段的子实体都在枯死的枝叶上出现,而无性阶段子实体大多在活体上可以找到。
(2)柔软多汁的子实体或果实材料,则应采集新发病的幼果。
(3)病毒病应尽量采集顶梢与新叶。
(4)线虫病害标本应采病变组织,为害根部的线虫病害标本除采集病根外还应采集根围土壤。
(5)表现蔫萎的植株要连根挖出,有时还要连同根际的土壤等一同采集。
(6)对于粗大的树枝和植株,则宜削取一片或割取一截。
(7)如果病害在叶、果实和枝干上都有表现时,尽量采集全面。
(8)寄生类应和寄主一起采集。病害症状很特殊病害,要连同植株的枝叶或花一起采集,以便鉴、定其寄主名称。
3 标本数据记录和标本编号
要求记录准确、简要、完整。完整的记录与标签同样十分重要,要有寄主名称、采集日期与地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。
4 标本采集 方法
(1)枝干类、根部病害标本的采集
取其得病部位,用锯、枝剪或高枝剪采取,切勿用手折断,影响标本的美观,对纤维长而强韧的枝干等,尤应注意。
(2) 叶部病害标本的采集
大型叶植物,它们的叶子和花序均很大,采集标本时可采一部分或分段采集,以同株上幼小叶加上花果组成一份标本(同时标明叶实际大小);或把叶、叶柄各自分段取其一部分;
对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集,并记录寄主的名称。
(3)肉质或多汁植物(花、果实)病害标本的采集
应将其纵切或横切,有时需将其内部的组织挖出,还要考虑是否将一半的材料浸泡在保存液中保存。在野外干燥时,要在切开的茎表面洒大量食盐,用盐包裹的材料应置于夹有多层报纸的标本夹中,24小时后要把浸有盐水的报纸移去,或者用开水将材料烫死,然后放置在薄纸板-铝板的三明治层中烘干。
(二)病害标本的制作
?从田间采回的标本,除一部分用作分离鉴定外,对于典型的病害症状最好是先摄影然后再压制或浸渍保存。压制或浸渍的标本尽可能保持其原有性状,微小的标本可以制成玻片,如双层玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。?
(三) 病害标本的保存?
1 干燥法 适用于一般含水较少的茎、叶等病害标本的制作,最简单、最经济、应用最广。
将采集的标本夹在吸水纸中,同时放入写有采集地点、日期和寄主名称的标签,再用标本夹压紧后日晒或加温烘烤,使其干燥,干燥愈快愈能保持原有的色泽,标本质量亦愈高。夏季采的标本在温湿度高的情况下,容易发霉变色,换纸宜勤,通常在压制的最初三、四天每天换纸l-2次(视标本含水多少,及温湿度情况而定),以后每二、三天换一次,至完全干燥为止。在第一次换纸的同时,应将标本加以整理,因经初步干燥,标本变软易于铺展。烟草、蚕豆、梨、马铃薯的茎叶等很易发黑变色,都是很难保存颜色的标本,在制作过程中特别要注意快速干燥。需要保持绿色的干制标本,可先将标本在2-4%硫酸铜溶液中浸24小时,或经过醋酸铜溶液(配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法)处理后再压制。也可以在叶面抹一层液体石蜡后再压,可以保持鲜绿色2-3天。?
2 ?浸渍法 适用于?多汁的病害标本,
如果实、块根或担子菌的子实体等,必须用浸渍法保存。浸渍液体种类很多,有纯属防腐性的,亦兼有保持标本原色的,现介绍数种常用及效果较好的方法。?
(1)防腐浸渍法:此类浸渍法仅能防腐而没有保色作用,如萝卜、甘薯等,不要求保色的标本,洗净后直接浸于以下溶液中。?
①5%福尔马林浸渍液。?
②亚硫酸浸渍液:l000ml水中加5%-6%亚硫酸15ml(一般市售的亚硫酸含量为5—?
6%)或用亚硫酸钠10.5g,浓硫酸8ml,水500ml配成混合液。?
?(2)保持绿色标本的浸渍液及浸泡法:???
①醋酸铜保(绿)色浸渍法:往50%的醋酸中逐渐加入醋酸铜结晶溶解至饱和作为母?
液(大约1000ml50%的醋酸中加入l5g醋酸铜即可达饱和),使用时兑水稀释1-4倍(稀?
释倍数视标本颜色而异,色深者稀释倍数可小些)。将此液加热煮沸,投入标本,开始时标本的绿色被漂去,再经数分钟后标本又恢复绿色,此时立即将标本取出,用清
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