环境工程微生物学案例.ppt

第七章 微生物的生长繁殖及其控制 7.1 细菌的群体生长 7.2 基质浓度与微生物比生长速率的关系 7.3 研究微生物生长的培养方法 7.4 微生物纯培养物的分离及生长的测定 7.5 环境因素对微生物生长的影响 7.6 微生物生长的控制 微生物的生长(microbial growth)是指微生物吸收营养物经代谢转化为自身细胞成使细胞体积扩大或细胞质量增加的生物学过程。 微生物的繁殖(microbial reproduction)系指微生物长到一定阶段，由于细胞结构复制与重建并通过特定方式产生新个体——个体数目增加的生物学过程。 生长是一个量变(个体由小到大或由轻到重)的过程； 繁殖是一个质变(新生命个体诞生)的过程。 微生物群体生长的研究更具有实际意义。 7.1 细菌的群体生长 微生物的群体生长(group growth of microorganisms)是指在一定时间内细胞数量的增加。 7.1.1 细菌的群体生长规律——生长曲线 将一定数量的纯种微生物细胞接种于一定体积的液体培养基内，在一定条件下进行培养，以生长时间为横坐标，以细菌数目的对数值（或细胞生物量）为纵坐标绘制的一条曲线称为生长曲线。 7.1.1 细菌的群体生长规律——生长曲线 (1) 延迟期 延迟期(1ag phase)：又叫迟缓期、迟滞期或调整期，是细菌对新环境的适应过程。 特点：分裂迟、代谢力强 细胞数目不增加，但代谢十分活跃。 核酸含量增加，诱导酶大量产生，合成中间产物，细胞体积增长很快，对环境变化较为敏感。 (2)对数期 对数期(log phase)：又叫指数期或生长旺盛期。 特点： 细菌的繁殖速度最快，以几何级数增加，即按2n的速度增加。 细菌数目的增加与培养时间成正比。 细胞活性最大，细胞组分合成非常迅速，细菌生长代谢十分旺盛，菌体有规律地高速繁殖，世代时间最短。 有毒代谢物积累很少，对不良因素的抵抗力很强，细胞死亡极少甚至不死亡。 (2)对数期（续） 单细胞增加一代所需要的时间称为世代时间(G)。 已知：t1时细菌数为X1；t2，繁殖n代后的细菌数X2=2nX1，计算世代时间G： G=（t2-t1）/n n=3.3(logX2-logX1) G=（t2-t1）/(3.3logX2/X1) G与培养条件相关 如E. coli，培养温度为21.5-21.8℃时，G=62.2min；37℃时，G=17min；超过50℃时便不能生长。 (3)稳定期 稳定期(stationary phase)：又叫最高生长期或平衡期。 特点： 生长率下降并出现部分菌体死亡，繁殖率与死亡率趋于平衡，活菌数保持相对稳定； 细菌代谢活力降低，细胞内开始贮藏物质； 芽孢细菌的芽孢开始形成。 适合于收获大量的菌体。 (4)衰亡期 衰亡期(decline phase)：又称死亡期。 特点： 细菌代谢活力大大下降，死亡率明显增加，活菌数迅速减少，甚至按几何级数下降。 芽孢细菌已形成芽孢，菌体出现自溶现象(即内源呼吸)，并释放出氨基酸、酶及抗生素等产物； 菌体细胞产生畸形，有的革兰染色阳性菌变为革兰阴性菌。 7.1.2 微生物生长曲线在废水生物处理中的指导作用 以培养时间为横坐标，以活性污泥干重为纵坐标绘制的曲线为活性污泥生长曲线；与细菌生长曲线类似； 7.1.2 微生物生长曲线在废水生物处理中的指导作用（续） 还表示为微生物的代谢速率与食料／微生物(质量或浓度)的关系。 7.2 基质浓度与微生物比生长速率的关系 1942年[法]学者莫诺特(Monod)提出； μ——微生物比生长速率，时间-1， 即单位生物量的增长速度，x为微生物的浓度； μmax——微生物的最大比生长速率，时间-1； S——基质浓度（质量/容积） Ks——比生长速率为最大比生长速率一半时的基质浓度。 7.3 研究微生物生长的培养方法 7.3.1 微生物的分批培养(bath culture of microorganisms) 分批培养是将微生物接种到一定体积的液体培养基中，使其在一定条件下生长繁殖的培养方法。 特点 培养基一次加入不再更换且不予补充。 微生物经历了一个细胞数量由少到多直至达到最大数量，而后又从多到少直至衰减死亡的生长过程， 序批式间歇曝气(SBR)是分批培养的具体应用。 7.3.2 微生物的连续培养 微生物的连续培养(continuous culture of microorganisms)：在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率增长并能持续生长下去的一种培养方法。 恒浊连续培养：控制流速使菌液浊度维持恒定；用于发酵工业。 恒化连续培养：控制培养基中某种营养物质的浓度保持恒定，使细菌的比生长速