离心分离原理与应用分解.ppt

1.沉淀分离 3. 离心分析 1）.利用大分子及微小颗粒在离心力场中的生物化学、物理、力学特性，通过光学、电子、照相、扫描记录它们在离心力场中的行为特征，得到表征它们理化特性的参数，沉降系数S值、扩散系数D、分子量M、浮力密度；生物粒子结构研究、组分分析等。 2）.设备：分析离心机、有分析系统的离心机。 二、离心理论与离心实验中涉及到的几个重要参数 1.离心分离理论 2.离心实验与离心设计中的几个重要参数 3.离心实验中转速与离心时间的计算与选择 1.离心分离理论 1）.物质在离心力场的作用原理 2）.颗粒的离心沉降理论 （1）.物质在离心力场的作用原理 离心技术是根据物质颗粒在离心力场中的行为发展起来的。不同质量、大小、形状的物质颗粒在离心力场中受力的作用,产生运动的速度取决于该颗粒处于所在离心力场（G）中所受离心力作用的大小。可由离心力场转头的角速度ω （以弧度/秒表示）和颗粒距离 旋转轴心的辐射距离（R，以厘米表示）来决定 即由下述方程表示。 转头旋转一周等于2π弧度，转头的角速度（r/min）可表示为： 离心力场为 （2）相对离心力加速度（RCF） 离心力场一般用相对离心力场以重力加速度常数g(980cm/s2)的倍数来表示，即RCF的单位为g。 相对离心力即为 上式n代表（r/min）可简化为： RCF=1.119×10-5(rpm)2R （r/min＝rpm） RCF： RCF值一般即为我们离心时所选择使用的离心力的大小，如选用离心力的十万g离心。即表示为100000×g 这里×g代表离心力场单位，不可分开。 g为重力加速度；（×g）表示重力加速度的倍数。 2） 颗粒离心沉降理论 （1）粘性介质溶液中的沉降作用 颗粒沉降行为及其运动速度不但取决于在所提供的离心力场中受到的离心力作用大小，也取决于颗粒密度、半径、形状，以及悬浮介质的粘度、密度等因素的作用。 根据斯托克斯（S.G.Stokes）定律，粘滞液体中的小球在离心力场中受离心力作用产生运动，通过液体介质时受到反向磨擦力，粘滞阻力（即阻力Ff）的反向作用。这个粘滞阻力为： 颗粒所受离心力Fc则为： ρ——小球体的密度 小球重为 、浮力为 当颗粒小球在Fc、Fb、Ff的共同作用下，在介质液体中运动达到平衡以匀速运动时，所受力系也达到平衡，其表达方程为： 即 当小球为圆球体时 以粒子的质量乘以偏微分比容和密度ρ来代替被置换的溶液质量m0。即 代入上式 偏微分比容 :是生物大分子的一个理化参数,与大分子本身的结构有密切关系。其定义为1克大分子溶质溶大量溶剂中发生的溶剂变化。(生物大分子的偏微分比容值基本上在0.6-0.75范围）。 沉降系数S定义：单位离心力场之速度即 S是反映离心力场行为特性的重要标志。沉降系数S单位量纲为秒。由于我们研究的颗粒很小（μm-nm级），S值一般也很小，以10-13为一个基本单位S。为记念奠基人Svedberg的贡献，S称为Svedberg常数。即1s=10-13秒。S是具有时间因次的量。S值的大小反映了物质颗粒的大小与结构，物理上的意义是单位离心力场的沉降速度。因次是cm/秒/达因/克。 （3）扩散系数D、分子量M与Svedberg公式 作用于一克分子溶质上的总离心力F （1） （M：溶质分子量， 溶质分子微分比容， 介质密度） 3.离心实验与离心设计中转速与离心时间的计算 1）沉淀离心中转速与时间的计算 （1）离心力场一般用相对离心力场（RCF）以重力常数g(980cm/秒2)的倍数来表示。因此