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依纲静悟 回归双基 考前热身 启动思维 倒数第3天 基因工程 依纲静悟 回归双基 知识内容 静悟内容 5-1 基因工程 【预测题型】 原理、流程填空 1.基因工程的诞 生(Ⅰ) 基因工程诞生的理论基础和技术支持有哪些?(各举例说明) 2.基因工程的原 理及技术(Ⅱ) 1.什么是基因工程?基因工程的原理是什么? 2.说出基因工程中的操作工具名称及其作用。 3.详细叙述基因工程的具体操作步骤、过程与方法。 (1)获取目的基因的方法 (2)作为载体的条件是什么?基因工程常用的载体有哪 些?载体上标记基因的作用是什么? (3)将目的基因导入受体细胞的途径有哪些? 知识内容 静悟内容 2.基因工程的原 理及技术(Ⅱ) (4)目的基因的检测与鉴定。 分子水平:是否整合(分子杂交技术/DNA探针); 是否转录(分子杂交技术/DNA探针); 是否翻译(抗原—抗体杂交/免疫反应); 个体水平:观察生物个体是否具有某特定性状。 3.基因工程的应 用(Ⅱ) 举例说明基因工程在动植物、微生物、医疗上的应用。 4.蛋白质工程 (Ⅰ) 1.什么是蛋白质工程?与基因工程有何关系? 2.简述蛋白质工程的一般思路。 1957年,生物学家了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,这种因子能作用于其他细胞,干扰病毒的复制,故将其命名为干扰素;从1987年开始,用基因工程方法生产的干扰素进入了工业化生产,并且大量投放市场。 (1)若已知干扰素的氨基酸序列,则获取目的基因的较简单方法是________;目的基因还可以从________文库获取,而从cDNA文库中不一定能得到,原因是____________________________________________ ____________________________________________________________。 (2)用限制酶处理质粒和目的基因后,用________酶处理,可形成基因表达载体,该载体的化学本质是________;基因表达载体除含有干扰素基因外,还必须有________、________和________等。 考前热身 启动思维 【热身练23】 (3)若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用________处理,使其成为________,并在一定温度作用下完成________。 (4)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是检测受体细胞________上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用________________。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质,利用的技术是_________________。 解析 (1)若已知干扰素的氨基酸序列,则可以通过逆转录法获得目的基因;cDNA文库是部分基因文库,因为cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的,因此目的基因可以从基因组文库中获取。(2)用限制酶处理载体和目的基因后,将目的基因与载体连接,需要使用DNA连接酶处理,基因与载体的化学本质是相同的,都是DNA;干扰素基因是目的基因,此外,载体还要有启动子、终止子、标记基因等。(3)目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。(4)检测目的基因使用DNA分子杂交技术;检测蛋白质采用的是抗原—抗体杂交技术。 答案 (1)人工合成法 基因组 cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的(其他合理答案也可) (2)DNA连接 DNA 启动子 终止子 标记基因 (3)Ca2+ 感受态细胞 转化 (4)染色体DNA DNA分子杂交技术 抗原—抗体杂交技术 质粒在基因工程中具有重要作用,请回答下列与质粒有关的知识。 Ⅰ.构建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。如图是天然土壤农杆菌Ti质粒的结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析回答问题。 (1)人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的为:第一,去除质粒上的________(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于________;第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。 【热身练24】 (2)(多选)质粒上的________________基因被删除,不会影响到转基因微生物的性状 ( )。 A.四环素抗性基因 B.复制原点 C.终止子 D.卡那霉素和新霉素抗性基因 (3)若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,
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