风湿病的常用免疫学检查 及临床应用 - 广州中医药大学幻灯片.ppt

风湿病的常用免疫学检查及临床应用 概 述 多数风湿病的发病机制都与免疫失调有关， 因此检测自身抗体（抗细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。）、补体、 淋巴细胞及其它免疫学成份有助于许多疾病的诊断、治疗和疗效判断。 对检验结果的判断必须密切结合临床，并进行综合分析。 抗核抗体(ANA） 是指抗细胞核成分的抗体，换言之是指一组对细胞核内 DNA 、RNA、蛋白质、或这些物质的分子复合物的自身抗体。 一、核的组成及其抗原性 细胞核是由核膜、核仁、染色质和核液组成。 核膜为双层脂质结构， 膜孔和内层的蛋白具有抗原性，间接免疫荧光 检查出现周边核染色。 核仁抗原包括核糖体蛋白、U3及Th小RNA s， PM-Scl抗原和核仁的Ku蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）。 染色质是由DNA和组蛋白组成，它排列的基本结构亚单位为核小体 数百种非组蛋白， 它们具有结构维持、基因表达及酶的作用，都是免疫反应潜在的目标， 二、检测方法 对流免疫电泳（ＣＩＥ） 间接免疫荧光（ＩＦ） 放射免疫（ＲＩＡ） 免疫印迹（ＩＢＴ） 酶联免疫吸咐试验（ＥＬＩＳＡ） 三、抗核抗体的种类及临床意义 1954年Hargrave发现SLE 病人血液中的LE细胞, 它是抗核抗体谱检查的起源, 它所针对的核抗原是DNA-主蛋白(DNP)，目前已采用了简易和迅速的抗DNP抗体测定取代LE 细胞的检查。它的阳性率在未治SLE中50-85％（＋），RA 10 ％（＋），PSS、PM/DM 及药物过敏等均有（＋）。 （一）分型 H．均质型：与组蛋白和抗DNA抗体有关，见于SLE, 药物性狼疮 S．斑点型： 与抗ENA抗体有关，见于CTD P．周边型 与抗DNA抗体有关，见于SLE C．着丝点型 与DNA蛋白结合体有关，为CREST 综合征的标记性抗体 N．核仁型 与抗4-6sRNA有关，见于PSS? 不同的底物ANA的阳性率不同。 国际以Hep-2作为基质 ━━━━━━━━━━━━━━ SLE PSS ━━━━━━━━━━━━━━ HEP-2 95％ 70％ 鼠肝 85％ 50％ ━━━━━━━━━━━━━━ （二）分类 1、ds-DNA检测 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ Farr（RIA） 结合力＞20％（＋） ＞30％ SLE TE（马疫锥虫） 1：5（＋） 1：10 SLE ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 2、抗Histon抗体 不同疾病中的阳性率（ELISA） 药物性狼疮 约为95％ SLE 50－70％ PM/DM 13％ RA 23％ 服INH 53％ SS 30％ 服他巴唑 20％ PSS 27％ 服苯妥因钠 18％ 3、抗ENA抗体 常见七种常见的ENA抗体 α-SM（病人名）α-J0-1（病人名John） α-RNP（nRNA）α-PM-1（polymyositis） α-SS-A（病名） α-Scl-70（sclerederma） α-SS-B（病名） 抗Sm抗体 仅在SLE中出现的阳性率为25％左右，它是SLE的标记性抗体， 它对早期，不典型SLE及治疗缓解后SLE的回顾性诊断有很大帮助 抗nRNP抗体 在多种风湿病中出现，常与双手肿胀，雷诺氏现象，指端硬化相关。当抗nRNP 阳性而同时抗dsDNA阴性，则肾病发生率较低。在METD中几乎100 ％阳性 抗SS-A/Ro抗体 在原发SS中70-80％（＋），SLE 40％（＋），RA 20％（＋）。以鼠肝为底物的ANA检测中，抗SS-A抗体常呈阴性反应， 用免疫印迹法检测时它可与60KD 和52KD 两条蛋白多肽反应，作者及一些文献都认为60KD的多肽在SLE中较SS更多见。进一步的研究表明抗SS-A抗体与新生儿狼疮，先天性房室传导阻滞，光敏感相关。 抗SS-B/La抗体 在原发SS中50-60％（＋），SLE 10％（＋）故有人称抗SS-B抗体是SS的标记性抗体。 抗RIB抗体（ribosome RNP)