1生物统计与实验设计3常用分子生物学技术.pptVIP

四、SSR技术 真核生物基因组中散布着大量的小卫星DNA和微卫星DNA，小卫星DNA由串联重复的短序列组成，它的重复单位一般在十几到几十bp，一个小卫星DNA的总长度达几十到几千个bp不等。微卫星DNA由更短的重复单位串联而成，重复长度一般为2~6bp，一个SSR总长度可达几十到几百bp。许多小卫星和微卫星间的不等交换或复制过程中的DNA滑动而高度可变，因而显示出了丰富的限制性片段多态性。正因为真核生物中富含简单重复序列，而重复序列两端往往是相对保守的限制酶位点，所以通过特异引物进行PCR扩增反应、琼脂糖凝胶电泳和放射自显影，就可检测到简单重复序列单位数不同的DNA区域多态性。 五、 mRNA差异显示反转录PCR 技术 mRNA差异显示原理：是通过比较两个来源不同的材料的mRNA来确定差别显示的原因，并可进一步分离出差异的基因。其方法是：人工合成两组引物，对细胞中约15000种转录的mRNA进行cDNA扩增，并显示出它们的电泳条带，不同材料的电泳条带比较，就可发现差异的基因。 5′—AGAAAAA……AA—3′ 5′—GTAAAAA……AA—3′ 5′—CGAAAAA……AA—3′ 5′—TTAAAAA……AA—3′ 5′—GGAAAAA……AA—3′ 5′—ACAAAAA……AA—3′ 5′—TGAAAAA……AA