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- 2017-02-04 发布于四川
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ppt课件-hylogeneticanalysisofwrkygenefamily
杆状病毒表达系统利用一种不依赖于辅助病毒的病毒,该病毒可在适于悬浮培养的昆虫细胞中增殖至高滴度,能获得大量的重组蛋白,大部分超量表达的蛋白质为可溶性蛋白.杆状病毒对脊椎动物无感染性。 (二)药物筛选转染细胞 哺乳动物细胞中最常用的选择性标记物中包括有细菌新霉素抗性基因(neor)。此基因具有对氨基糖苷抗生素G-418(新霉素衍生物)的抗性。G-418是用于阻断细胞内的蛋白质合成,从而达到杀伤真核细胞的目的。如果将带有neor基因的质粒导入细胞,并在含有G-418的培养基中培养,未转染的细胞被杀死,而存活的细胞便是转染细胞。 第五节 克隆基因的表达 ? 基因工程的主要目的之一,就是要制备大量有用的蛋白质和多肽,尤其是人体蛋白。得到了克隆的基因或cDNA后,按照正确的方向插入表达载体,连在启动子的后面,导入相应的宿主细胞,即可进行表达。在不同的表达系统中,其表达方式不尽相同。 真核生物结构基因示意图 真核生物基因的结构特点 原核生物基因的结构特点 基因是连续的, 无内含子 一、大肠杆菌表达系统 大肠杆菌表达外源基因的优势 繁殖迅速 培养简单 操作方便 遗传稳定 大肠杆菌表达外源基因的劣势 1.缺乏对真核生物蛋
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