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- 2017-02-04 发布于天津
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植物组织中丙二醛含量测定
植物组织中可溶性蛋白的测定 植物叶片衰老过程中,叶绿素含量下降,叶色变黄,蛋白质含量减少(可溶性蛋白) 实验原理 可溶性蛋白测定:缓冲液提取后可溶性蛋白溶于上清液中,蛋白质提取液与考马斯亮蓝G-250反应呈蓝色。在595nm处有最大吸收峰。 实验步骤 制备匀浆 48小时前预处理:称取叶片三份,每份1g(最好打圆孔),30度恒温箱放置。 No 1: water 20ml (control); No 2: 10ppm BA 20 ml; in darkness at 30 ℃ 2d. No 3: 10ppm ABA 20 ml 提取 称叶龄差异明显的叶片各1.00g ,加入5ml 磷酸缓冲液(50mmol,pH值为7.8)及少量石英砂,于冰浴中研磨提取,匀浆液以10 000g 离心力作用下(4度)离心10min,其上清液即为蛋白提取液。 显色反应 取0.1 ml 加入5ml考马斯亮蓝,595nm比色; 可溶性蛋白质含量的计算 可溶性蛋白含量 (μg/g.FW)=标准曲线上查得的蛋白质量( μg ) × 5/0.1 示意如下: MDA含量计算公式 激素与衰老的关系? * * L为
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