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实验室标准操作规程SOP
实验室标准操作程序(SOP)版 号:第一版编 制:审 核:批 准:受控状态:发放编号:持 有 人:发布日期: 2007年08月0更 改 一 览 表序号更改时间更 改 章 节 号更改单号备 注00. 目 录章节标题页数01细菌总数的检验402大肠菌群、大肠杆菌的检验503金黄色葡萄球菌的检验504沙门氏菌的检验605副溶血性弧菌的检验706霍乱弧菌的检验807单核细胞增生李斯特氏菌的检验908志贺氏菌的检验1009霉菌的检验1110表面样品的检验1211水的检验1301. 出口食品细菌总数的检验方法1.仪器和设备1.1恒温培养箱:36±1℃1.2恒温水浴箱:45±1℃1.3高压灭菌锅1.4均质器1. 5冰箱:0-4℃和-15~-201.6试管:18×150mm1.7锥形瓶:500ml 250ml1.8平皿:直径为90mm1.9灭菌吸管 1.10灭菌均质杯 1.11酒精棉1.12天平:感量0.1g2.培养基的制备2.1 生理盐水: 称氯化钠8.5g溶于1000.0ml蒸馏水中,分装锥形瓶和试管内,每管吸9ml,121℃高压灭菌。2.2平板计数琼脂称平板计数琼脂23.5g加入1000.0ml蒸馏水中,煮沸溶解,分装锥形瓶内,121℃高压灭菌。3.操作程序3.1样品稀释 以无菌操作取25g样品 放入装有225ml生理盐水的灭菌均质杯内,均质1分30秒,制成1:10的样品匀液 用灭菌吸管吸取1ml样液放入9ml生理盐水中,摇匀。 从试管中吸取1ml样液 分别注入两个平皿内, 制成10倍的样品稀释液, 依次类推(10-2、10-3) 平板计数琼脂(恒温45±1℃)分别倒12-15ml平板计数琼脂入各平皿 待琼脂凝固后将平皿翻转 立即将平皿内的样液和琼脂充分混合 将平皿旋转,注意倾注时间不宜太长 立即放进36±1℃的恒温培养箱内 培养48±2h3.2培养4.计算如下表(备注:25-250个菌落为合适范围,菌落成链状明显的计为一个菌落,不明显的不计数,平皿边缘和琼脂表面成水膜样菌落或生长过量的,即报告为蔓延菌落。)样品号 菌 落 数平皿菌落数1:10 1:100 1 16 0212 18 02.3×103个/g2236 26 0227 28 02.5×103个/g318 0 014 4 01.6×102个/g4多不可计 245 23多不可计 278 202.6×104个/g50 0 00 0 0<10个/g6多不可计 255 21多不可计 225 402.7×104个/g7多不可计 210 18多不可计 240 282.3×104个/g8多不可计 260 30多不可计 230 282.7×104个/g9多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5.1×105个/g10多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落2.9×104个/g02.出口食品大肠菌群和大肠杆菌的检验方法仪器和设备1.1恒温培养箱:36±1℃1.2恒温水浴箱:44.5±1℃1.3高压灭菌锅1.4均质器1.5试管:18×150mm、18×180mm1.6锥形瓶:500ml 250ml1.7平皿:直径为90mm1.8灭菌均质杯 1.9灭菌吸管1.10酒精棉1.11天平:感量0.1g1.12冰箱:0-4℃和-15~-201.13显微镜2.培养基的制备2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤称35.6g溶于10
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