_细胞器的分离、纯化实.pptVIP

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  • 2017-02-05 发布于湖北
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* * 细胞器的分离、纯化 — 细胞分级分离法 —秦川 实验目的 实验原理 实验用品 实验方法 应用范围: 1.病毒及亚细胞 组份分离 2.蛋白梯度分离 3.脂蛋白分离 4.RNA梯度沉淀 5.质粒DNA提纯 Back 认识离心机及学习离心机的使用方法 学习细胞器的分离及纯化的一般原理和方法 实验目的 Back 实验原理 离心技术是借助于离心机旋转所产生的离心力,根据物质颖粒的沉降系数、质量、密度及浮力等因子的不同,而使物质分离的分离分析技术。 细胞分级分离式一种通过离心从而分离细胞内不同结构成分的细胞器。不同的细胞器的大小和密度不同,在同一离心场内的沉降速度不同,用差速离心法、密度梯度离心法、密度梯度平衡离心法分离细胞器。 差速离心法是从低到高不同的转速离心,使较大的颗粒先在低转速中沉淀,再用较高转速将原来悬浮的小颗粒物质沉淀下来,从而达到逐级分离。 相对离心力(RCF) 由于转头有不同的制造商制造,半径不同,故用相对离心力来表示离心力的大小。 RCF (×g) = Fc/F重力 = mG/mg = r·ω2/g = 1.119×10-5·N2·r =11.2r(N/1000)2 也有: 根据这个公式,相对离心力

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