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基因工程 遗传学角度：一项遗传学技术 将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，创造生物新品种或新物种的遗传学技术 无性繁殖：称之为“克隆” 行使正常功能：称之为“表达” 基因工程生物化学角度：重组载体的操作 在体外，将各种来源的DNA片段与载体DNA结合成一个重组载体；重组载体可转化或转染宿主细胞，并在宿主细胞内表达，产生特定的基因产物。 DNA片段：同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的 载体DNA ：病毒、细菌质粒或噬菌体 有关术语解释： DNA嵌合体（DNA chimera） ：内、外源DNA插入载体分子所形成的杂合分子（嵌合DNA） 重组（ recombination）：构建DNA嵌合体分子的过程 基因工程的主要内容? 获得目的基因(Gene Cloning) ? 构造重组 DNA 分子 ? 转化或转染 ? 表达 ? 蛋白质产物的分离纯化 基因克隆示意图 基因工程大事记 1973 Cohen第一例成功的克隆实验 1978 Genentech公司 人胰岛素 世界上第一种基因工程蛋白药物 1982 第一个基因工程药物--重组人胰岛素在英、美获准使用 1985 第一批转基因家畜（兔、猪和羊），中国 转基因鱼 1993 基因工程西红柿在美国上市 1997 英国罗斯林研究所 多莉羊 1999.9 中国获准加入人类基因组计划.负责测定人类基因组全部序列的1% 2000.6.26 科学家公布人类基因组工作草图 2001.2.11 公布人类基因组基本信息 生物技术工程：基因工程、蛋白质工程、酶工程、细胞工程 胰岛素 人生长激素 干扰素 白细胞介素2 粒细胞集落刺激因子 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 红细胞生成素 EPO 组织纤溶酶原激活剂 生长激素 促生长素 抗血友病因子Ⅷ 脱氧核糖核酸酶 葡糖脑苷脂酶 鼠单克隆抗体 自然界的基因转移和重组 基因重组(genetic recombination)——整段DNA在细胞内或细胞间,甚至不同物种间进行交换,并能在新的位置上复制,转录和翻译 自然界的基因转移和重组是无目的 基因工程有目的 接合作用 质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至另一个细胞（细菌） 转化作用 transformation 通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型的过程 转导作用 transduction 病毒、噬菌体介导 溶菌途径；溶原菌途径 基因工程技术及其应用 用于提高奶酪产量 生产奶酪的凝乳酶传统上来自哺乳小牛的胃。现在可以通过基因工程办法，用酵母生产凝乳酶，大量用于奶酪制造。 转基因动物和植物 转基因动物首先在小鼠获得成功。现在转基因动物技术已用于牛、羊，使得从 牛/羊 奶中可以生产蛋白质药物。称为“乳腺反应器”工程。 转基因植物亦已在大田中广为播种。 ?工程菌在环境工程中应用 美国 GE 公司构造成功具有巨大烃类分解能力的工程菌，并获专利，用于清除石油污染。 基因本身也是一个产业 Rockfeller 大学将人肥胖基因出售0.2亿美元（1995年3月） Amgen公司将FKBP神经免疫因子配体转让达3.29亿美元（1997年） Millennium公司以4.65亿美元向Bayer公司转让225种基因的开发权（1998年9月） 喷洒工程菌清除石油污染 * 将在细胞外产生的核酸分子 插入病毒, 质粒或其它载体系统中 再整合到那些本来不含该类物质的宿主中 从而形成一种新的可连续繁殖的有机体 基因工程原理 一、基因工程的定义： 克隆(Clone) 从一个共同祖先无性繁殖下来的一群同一DNA分子,细胞或个体所组成的特殊的生命群体 克隆(Cloning) 指上述的过程 细菌的混合液中如何得到某个细胞的克隆 ? DNA片段的混合液中如何得到某个DNA片段的克隆 ? 相关术语 遗传工程（Genetic engineering） 基因工程(Gene engineering) 基因操作(Gene manipulation) 重组DNA技术(Recombinant DNA technology) 基因克隆(Gene cloning) 分子克隆(Molecular cloning) 基因工程的主要研究内容: 获得具有遗传信息的目的基因; 选择基因载体获得重组DNA; 将重组DNA分子导入宿主细胞; 鉴定带有目的基因的克隆; 目的基因的扩增及获得目的产物. 基因克隆的核心----- DNA体外重组(Recombinatio