【2017年整理】电穿孔.docVIP

电穿孔是功能强大的将核酸、蛋白及其它分子导入多种细胞的高效技术。通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法，是一种有价值和有效的替代方法。Gene Pulser Xcell 系统的设计，基于Bio-Rad 15 年来在电转化技术上经验积累，它提供指数波和方波波型选择、 系统配置选择及友好的用户界面。主要特点* 指数波和方波波型确保所有细胞类型（原核及真核）均可获得最佳 的电转化效果* Bio-Rad 专利的* PulseTrac 电路和电弧保护设计，确保可重复性 并保护样品* 模块化设计可根据研究需要选择系统* 用户友好的数字化界面，具有直观的编程以控制所有参数， 包括附属模块的参数* 包括人工操作、预设规程、用户规程、一个优化规程及其它先进 功能等程序选择 * 美国专利4,750,100 和4,910,140。指数波或方波脉冲选择Gene Pulser Xcell 系统可产生指数波和方波波型，使你选择最 适合你细胞的波型与规程。指数波和方波均能有效地用于电转化及 电融合。电穿孔波型对不同类型细胞的转化效率有很重要的影响。PulseTrac 电路和电弧保护提供可靠的、可重复的和安全的性能Bio-Rad 独创的专利微处理器控制电路能为任何规程提供可重复的结果，无论使用何种介质，它所产生的电压 值可在全世界范围内测试。PulseTrac 电路和电弧保护：* 确保电压准确地传送到电击杯* 把CE 模块中的低压电容器精确度从20% 提升到10%* 便于电容器再校正，以保持精确的脉冲指标，修正电容器随着时间而发生的偏移* 提供脉冲前样品电阻测量* 当脉冲或电路中断时，可安全地自动放电* 降低电弧危险，保护设备及样品用户友好界面，便于编程和控制主单元上的图形界面可控制包括任何连接的附属模块在内的所有功能。界面由一个通过功能键和字母数字键盘 操作的屏幕组成。根据屏幕提示进行简便而直观的编程。屏幕用于编程和显示储存与设定的程序、运行参数以及波 型。规程包括：* 人工编程以输入或编辑方波或指数衰变脉冲的所有参数* 辅助编程需要的时间常数* 预设有适合常用细菌、真菌和哺乳动物细胞株的优化程序* 优化规程* 根据不同的波型选择，显示时间常数、实际电压、脉冲间隔和脉冲时间等参数* 储存和调用前100 个实验的脉冲参数预优化规程，可快速选择程序这项功能为每个细胞株提供一组专用的预优化参数。提供以下细胞株的预设程序哺乳动物 细菌 真菌CHO Escherichia coli Saccharomyces cerevisiaeCOS-7 Agrobacterium tumefaciens Pichia pastoris3T3 Pseudomonas aeruginosa Candida albicans293 Staphylococcus aureus Schizosaccharomyces pombeHeLa Bacillus cereus Dictyostelium discoideumBHK21 Streptococcus pyrogenes A549 Lactobacillus plantarum CV1 K562 HL60 Jurkat HuT78 这些细胞株的详细参数及制备电感受态细胞的详细信息可查询Gene Pulser Xcell 系统指导手册或 网站。选择你所需要的系统Gene Pulser Xcell 是由一个主单元、2 个附属模块（CE 与PC 模块）及ShockPod 电击槽组成的模块式电穿 孔系统。CE 模块与Gene Pulser Xcell 主单元配合使用可电转化多数真核细胞（包括哺乳动物细胞和植物原生质 体）。PC 模块建议用于细菌和真菌的电转化，或其它需要在小体积和高电阻样品上施加高电压脉冲的应用。系统有 3 种组合。Gene Pulser Xcell 选择系统系统 内容Gene Pulser Xcell 完全系统 完全系统包括PC 模块和CE 模块，具有用指数波或方波脉冲转化真核与原核细胞的完整功能。Gene Pulser Xcell 真核系统 真核系统由主单元及CE 模块组成，可电转化哺乳动物细胞和植物原生质体。CE 模块具有25-3,275 μF 跨度，提供了一种通过增加脉冲时间常数来控制电路电容的方法。对于方波脉冲，CE 模块能提供从传送方波脉冲到低电阻介质所需的大电容。Gene Pulser Xcell 微生物系统 微生物系