不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响概要.docxVIP

不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响【摘要】目的：掌握制备蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本的方法；观察不同强度、频率和肌肉收缩反应之间的关系，了解肌肉收缩形成的过程。方法：采用活体蟾蜍制备坐骨神经腓肠肌标本；在刺激时间恒定的条件下，分别用不同强度和频率的电刺激作用坐骨神经，再通过RM6240系统记录蟾蜍腓肠肌的收缩变化。结果：给予增量为0.005v的强度递增电刺激后，当刺激强度在0v到0.235v之间时，肌肉不收缩；当刺激强度为0.235v时，肌肉收缩曲线出现第一个峰；随着刺激强度增加，峰值升高；当刺激强度到达0.330v后，峰值不再升高。给予坐骨神经频率增量为2Hz、强度为1v、组间延时2s、延时20ms、波宽5ms的频率递增刺激后，当刺激频率为3Hz时，肌肉收缩曲线开始出现重合，并且随着频率增加，肌肉收缩曲线的重合愈多、最高点逐渐升高。结论：电刺激强度达到阈强度时，肌肉才开始收缩，且随着刺激强度的增大，肌肉收缩增强；达到最大刺激强度后，肌肉收缩不再增强。电刺激频率较小时，刺激的间隔大于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉收缩表现为单次收缩；当增大刺激频率，使刺激的间隔大于一次肌肉收缩的收缩时间、小于一次肌肉收缩的舒张时间，则肌肉收缩产生不完全强直收缩；随着频率的继续增加，使刺激的间隔小于一次肌肉收缩的收缩时间 ，则肌肉产生完全强直收缩。【关键词】坐骨神经腓肠肌；刺激；强度；频率；收缩张力1实验材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物蟾蜍（由浙江中医药大学动物实验中心提供）。1.1.2实验材料和器械蛙类解剖手术器械，蛙板，蛙钉，玻璃板，培养皿，任氏液，锌铜弓，金属探针，玻璃分针，镊子，剪刀，手术剪，铁支架，一维位移微调器，刺激电极，张力换能器，微机化生物信号采集处理系统（RM6240），BB3G标本盒。1.2实验方法1.2.1制备坐骨神经腓肠肌标本1.2.1.1捣毁脑脊髓取蟾蜍一只，左手握住，以食指抬头部前端使其头部尽量后仰，右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入，将探针向上刺入颅腔，向各侧搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针反向刺入椎管，捻动探针捣毁脊髓，直到蟾蜍四肢松软。1.2.1.2剪除躯干上部及内脏用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住脊柱，右手将粗剪刀沿腹壁两侧（避开坐骨神经）剪除全部躯干上部及内脏组织。1.2.1.3剥皮避开神经，用右手食指和拇指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥除。洗净双手和用过的器械。1.2.1.4分离两腿避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开。将标本放置于任氏液的培养皿中。1.2.1.5分离坐骨神经取一条腿，先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用蛙针将标本卑微固定于干净的蛙板上。用玻璃分针纵向探查坐骨神经的走向，用剪刀剪开周围肌肉等组织，暴露坐骨神经。再剪下连有坐骨神经的两三节椎骨，剪去坐骨神经的分支，充分分离坐骨神经。1.2.1.6分离腓肠肌将已分离的坐骨神经搭在腓肠肌上。用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮干净所有大腿肌肉，在距膝关节1cm处剪断股骨。弃去上端股骨及组织。用玻璃分针分离腓肠肌跟腱并穿线打结。提起结扎线，在结扎处下方剪断跟腱，并逐步游离腓肠肌至膝关节处。剪去其余小腿部分组织。将标本放置于任氏液中。1.2.1.8检测标本活性轻轻提起连有坐骨神经的椎骨端，将锌铜弓的两个极靠在坐骨神经上。若腓肠肌收缩，则表明该标本有活性。1.2.2连接实验装置和仪器参数设置张力换能器的输出端与RM6240的输入第1通道相连，刺激输出接标本盒刺激电极。启动RM6240系统软件，在系统软件窗口设置仪器参数。RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“刺激强度（或频率）对肌肉收缩的影响”项。仪器参数：通道模式为张力，时间常数为直流，滤波频率100Hz，扫描速度2.0s/div，灵敏度15g。在“选择”下拉菜单中选择“强度/频率”项，显示刺激参数。1.2.3实验观察1.2.3.1刺激强度对肌肉收缩的影响设置参数：正电压刺激，电刺激模式为强度递增，刺激强度从0.02V逐渐增大，强度增量为0.005V。 测量并记录每一刺激强度所对应的肌肉收缩张力，确定阈强度和最大刺激强度。1.2.3.1刺激频率对肌肉收缩的影响设置参数：电刺激模式为频率递增，增量为2Hz、强度为1v、组间延时2s、延时20ms、波宽5ms。 测量并连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率时的肌肉收缩形态和张力变化[1]。2实验结果 实验名称：不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响实验日期：2016-05-31实验人员：张伊娜、谢来娣、陈扬扬、龚丽芬、龚青青图1:不同刺激强度下骨骼肌的收缩情况图2：单收缩图3：不完全强直收缩图3：完全强直收缩注：图2-4：不同刺激频率下骨骼肌的收缩