微生物代谢工程策略.doc

简介 自从DNA重组技术的出现,基因工程　　的,尤其是微生物,已经成功重组蛋白和小分子化学物质。对于后者,除了简单的基因工程策略通常他们需要通过多个细胞内合成反应,由各种因素更加复杂　　包括辅因子平衡和调节回路。代谢　　细胞工程可以被定义为利用DNA重组和其他分子生物学技术有目的的修改代谢代谢工程认为代谢和细胞系统作为一个整体, 从简单的基因工程因此允许操作系统此外,代谢工程是有利在简单的基因工程或随机诱变,因为它允许定义工程细胞,从而避免不必要的细胞的变化必要时,允许进一步的工程。在最近的报告众多代谢工程的成功例子,L-valine[4],苏氨酸[5],番茄红素的高效生产抗疟药物前体　[6],该类苄基异喹啉生物碱代表如何进行代谢工程达到期望的目标。　像其他工业有用的化学物质,代谢工程的主要目标药物植物次生代谢物的药用价值,如青蒿素酸,紫杉醇前体苄基异喹啉微生物代谢工程药物和药物前体 天蓝色链霉菌克拉维酸棒状链霉菌达托霉素变铅青链霉菌红霉素A红色糖多孢菌 磷霉素变铅青链霉菌羊毛硫氨酸抗生素番茄红素大肠杆菌青蒿素大肠杆菌青蒿酸酿酒酵链霉菌棘霉素大肠杆菌大肠杆菌微生物重组大肠杆菌生产人胰岛素被认为是简单的DNA重组技术结果,但复杂蛋白质也可以产生微生物的代谢和细胞工程(11、12)。　结构和功能不同抗生素代谢工程的出现耐药病原体(13、14)。在本文中, 描述有关代谢工程策略用于药品生产的例子。另外,我们建议运用代谢工程发展新型药物和有效地生产。 许多发现微生物、植物和动物化学物质和生物分子作为药物。这些只有微量药物合成,它获得合适的数量是困难。这就是代谢工程发挥作用。 我们理解代谢途径上的最新进展这些药物合成在一起随着各种基因和分析工具的发展使更系统和严格的微生物工程药品生产代谢工程微生物药物有几个优点或从自然资源。化学物质被用作药物通常具有复杂的结构包括手性合成是相当困难的。同时,自然资源提取医学价值的化合物效率会很低,并且可能会导致负面的减少资源相反,药物可以相对便宜基板微生物发酵产生在一个受控的和一致的方式　另一个明显的优势更快速的增长非核糖体多这些优势是微生物生产药物和药物前体　虽然生产药物的最终形式可能会,在很多情况下实验和经济条件下也支持生物合成药物前体。如果有进行化学转化方法微生物生产药物其最终形式,有价值的在这些例中代谢工程生产青蒿素酸,它是一种抗疟药青蒿素,可以化学转换最终。因此,高效的生产青蒿素是可能的在某些情况下,药物可能也有其他工业或药用,证明其生产规模大例如, L-valineL·缬氨酸是一种必需氨基酸,在食品行业具有重要的应用,包括和健康饮料、和动物饲料行业,也是一些抗生素,莫能菌素, cervimycin C,valanimycin微生物代谢工程生物合成高影响微生物系统,允许生产各种苄基异喹啉苄基异喹啉是植物次生代谢产广泛的医药应用,比如止痛剂化合物, 抗菌药物和抗疟和抗癌药物。　为此,(S)-reticuline,生物合成各种该类生物碱关键中间体,微生物代谢工程和植物的基因利用大肠杆菌在新建的途径中的大肠杆菌单胺氧化酶(MAO)34-DHPAA和norcoclaurine。 目标药物 主机选择 增长的需求，遗传工具的可利用性，符合目的药物产品的生理适用性，生理适用性和代谢信息 野生型菌株 计算分析 细胞的全基因组分析 ，预测工程目标,设计合理的实验 分析数据 组学数据中提取信息，系统与高通量组学数据分析 代谢工程 扩增反应，删除不必要的通路和结构，生物合成途径的不同的表达，优化使用的密码子，优化基因表达，组合生物合成 工程应变 发酵下游流程 媒体设计，副产品删除，发酵条件，喂养策略，净化复苏 工业规模化生产 微生物代谢工程药物生产要考虑的第一个问题是选择药物生产　然后,考虑各种因素包括药物的代谢特征和合适的宿主菌株　计算仿真和高通量组学分析促进代谢的系统分析,预测代谢型,蛋白质、代谢物和在不同的条件下通量　通过建立新的路径执行代谢途径设计和优化优化现有的途径,和监管路工程。使用发达的菌株,发酵和下游加工执行生产这种药物发酵性能净化过程和观察的基础进一步代谢工程可以执行。用于工业生产药物。 全去甲劳丹碱6OMT把全去甲劳丹碱(S)-30-hydroxycoclaurine，CNMT把(S)-30-hydroxycoclaurine转变成(S)-30-hydroxy-N- methylcoclaurine ，最后40OMT把(S)-30-hydroxy-N-methylcoclaurine转变成(S)-reticuline。作为一个工作示例co-culturing工程大肠杆菌和美国酵母细