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胚胎工程的用及前景
试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 二、体外受精和胚胎体外培养 体外受精 概念:将受精卵在人工环境下培养成早期胚胎。 培养液:(不同时期成分不同) 水、无机盐、有机物、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。 供受体模式—引进牛地方黄牛 胚胎移植的优势 (四)胚胎移植的基本程序:(以波尔山羊为例) 模式之一——波尔羊奶山羊 模式之二—杜泊羊地方绵羊 羊同期发情 供体超排处理:注射促性腺激素 供体配种 胚胎收集:冲卵 胚胎检查 胚胎检查 胚胎检查 胚胎移植或保存 胚胎移植 2)非手术移植 非手术移植一般在发情后第六至第九天(即胚泡阶段)进行,过早移植会影响受胎率。在非手术移植中采用胚胎移植枪和0.25毫升细管移植的效果较好。将细管截去适量,吸入少许保存液,吸一个气泡,然后吸人含胚胎的少许保存液,吸人一个气泡,最后再吸取少许保存液。将装有胚胎的吸管装入移植枪内,通过子宫颈插入子宫角深部,注入胚胎。非手术移植要严格遵守无菌操作规程,以防生殖道感染。 为什么胚胎移植能成功? 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗? 同种动物发情排卵后,在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境。 为什么能收集到胚胎? 早期胚胎一定时间内处于游离状态。 供体和受体会不会发生排斥? 同种动物之间基本上不排斥。 移植的胚胎能否保留供体双亲的特性? 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但其遗传特性不受受体的影响。 二、胚胎分割 胚胎分割的基本过程 胚胎移入培养液; 分割胚胎(机械法、酶处理); 移植胚胎给受体; 着床产仔。 胚胎分割的基本操作 (3)酶软化透明带后显微分割法 用0.5%的链霉蛋白酶软化胚胎透明带, 若是紧密化胚胎(如桑椹胚) , 则需在无钙、镁的平衡盐溶液中处理20 分钟, 使胚胎去紧密化,将胚胎固定,把将针置于欲分割的胚胎上面, 使其与胚胎呈30 度角, 对准胚胎的正中平分线徐徐下压,即可将一个胚胎分割成两半。 (4)酶消化去透明带后分割法 用0.25%~0.5%的链霉蛋白酶去掉胚胎透明带, 然后用显微玻璃针或微手术刀将裸胚一分为二。 (5)徒手分割法 主要适用于分割体积较大的胚胎; 优势:可以不用显微操作仪。 操作:在立体显微镜下,用止血钳夹住切割刀片,将透明带切开一部分,再用直径略小于胚胎的毛细管吹吸几次,胚胎从透明带中脱出。手持玻璃针自上而下对称切割裸胚。这种方法多用于分割桑椹胚和囊胚。该方法操作简便、快速,便于生产应用,但要求要有较为灵巧的操作技能。 (2)遗传一致性问题,同一胚胎切割后获得的后代,在理论上,遗传性状应该完全一致,但事实并不这样。人们发现6~7日龄牛胚胎分割后,同卵双生犊牛的毛色和斑纹并不完全相同,而在2-细胞阶段分割,却表现出遗传一致性。这种现象与胚胎细胞的分化有密切关系,但目前对不同阶段胚胎细胞的分化时间和发育潜力了解很少; (3)最后还存在同卵多胎的局限性,从目前的研究来看,由一枚胚胎通过胚胎分割方式获得的后代数量有限。迄今,最好的结果是由一枚牛胚胎获得3个牛犊,这说明孪生胚胎的发育潜力很有限。因此,通过胚胎分割技术生产大量克隆动物目前难以取得进展。 练习 2 .干细胞的增殖特点 缓慢性:干细胞的增殖速度一般比较慢。而一旦机体需要时,干细胞就可以进入分化。 自稳性:会自我更新维持自身数目的恒定。 全能干细胞 多能干细胞 单能干细胞 全能干细胞 是指具有无限分化潜能,能分化成所有组织和器官的干细胞。换句话说,也就是具有形成完整个体分化潜能。 多能干细胞具有增殖、分化两种功能。 Eg.骨髓造血干细胞 造血干细胞一般条件下处于休止状态,一定条件下能大量增殖、分化,然后由定向干细胞再分化成血液中至少12种类型的血细胞。 [2].干细胞来源上分: 来源上讲,干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞。 (二)成体干细胞 成体干细胞是成体组织内具有自我更新及分化一种或一种以上子细胞的未成熟细胞。 主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。 胚胎干细胞 来源 a.取自终止妊娠的胎儿的性器官组织。 c.通过体细胞核转移技术获 来源于干细胞的组织可能用于治疗的疾病: 细胞类型 治疗的疾病 神经细胞 中风、帕金森氏病、老年痴呆症、 脊髓损伤、多发性硬化病 心肌细胞 心脏病发作、充血性心脏病 产生胰岛素的细胞 糖尿病 软骨细胞
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