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第三章 谷氨酸产生菌及其扩大培养 1.谷氨酸产生菌的特征与分类 2.国内生产中使用的谷氨酸发酵菌株 3.谷氨酸产生菌的筛选 4.谷氨酸产生菌的分离纯化与保藏 5. 菌种的扩大培养和种子的质量要求 1.谷氨酸产生菌的特征与分类 1.1 谷氨酸产生菌的来源 ①野生型菌株（棒杆菌属；短杆菌属；小杆菌 属；节杆菌属）。 ②人工诱变株（营养缺陷型；抗结构类似物突变株；抗phage突变株；温度敏感型突变株）。 1.2谷氨酸产生菌的特征与分类 ①分类：伯捷细菌分类手册 界（kingdom）；门（phylum）；纲（class）；目（order）；科（family）；属（germs）；种（species）；株（strain） 植物界；细菌门；真细菌纲；真细菌目； 短杆菌科（短杆菌属）； 棒杆菌科（棒杆菌属） 。 ②分类的依据 形态特征 生理特征和生化反应 1.3 糖质原料谷氨酸产生菌的特点 ①形态 ②G＋ ③无芽孢 ④无鞭毛 ⑤需氧微生物 ⑥生物素为生长因子 ⑦脲酶活性强 ⑧不能利用淀粉 ⑨谷氨酸脱氢酶活性强大，α-酮戊二酸脱氢酶活性弱。 2.国内生产中使用的谷氨酸发酵菌株 2.1 国内生产中使用的谷氨酸发酵菌株 我国氨基酸发酵的历史已有40年，先后使用的菌株： As1299；7338；D110 As1542；Hu7251；B9 T6-13；FM84-415；S9114 3.谷氨酸产生菌的筛选 ①样品采集 ②平板分离 ③初筛 ④复筛 ⑤发酵实验 4.谷氨酸产生菌的分离纯化与保藏 4.1 谷氨酸产生菌的分离纯化 4.1.1 菌种退化的原因 4.1.2 菌体变异现象 4.1.3 分离纯化的步骤 4.1.4分离纯化的意义 菌种为什么要分离纯化？产生了退化。 4.1.1 退化的原因： 自发突变率10-8 诱变菌种会产生恢复突变。 4.1.2菌体变异现象 显微镜检，菌体形态多样，大小不均匀。 菌体生长速度缓慢，发酵周期拉长。 底物消耗速度慢，目的产物产量低，或发酵后期，只耗底物不产产物。 4.1.3分离纯化步骤 平板稀释或划线分离，分离单菌落。 对分离的单菌落斜面进行小型发酵实验，筛选高产菌株。 4.1.4 分离纯化的意义 保证稳产高产的措施。 进行生产育种，自然育种。 4.2 菌种的保藏 斜面，4℃冰箱保存，生产用菌， 使用方便。 液体石蜡，保藏几年。 真空冷冻干燥，可保藏十几年。 5. 种子的扩大培养和种子的质量要求5.1种子培养液的质量要求 谷氨酸生产种子培养液的质量要求： 镜检：G+、健壮、八字排列整齐。 细胞数量108-109个/mL。（细胞记数方法） pH变化规律：6.8-8.0-7.0-7.2。 呼吸强度＞1000μL O2/mL种子液·h。 * *