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基因工程试卷B 一． 名词解释（每个2分，共20分） 1、转化: 2、质粒转移性: 3、DNA文库: 4、RACE: 5、选择标记基因: 6、降落PCR 7、载体: 8、感受态细胞: 9CaMV35s: 10、ORF: 二、选择题（每题1分，共15分） 1( ) 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是 修复自身的遗传缺陷 促进自身的基因重组 强化自身的核酸代谢 提高自身的防御能力 生物工程的游技术是 基因工程及分离工程 蛋白质工程及发酵工程 基因工程及蛋白质工程分离工程及蛋白质工程基因工程操作是:(I II 连接酶III 末端转移酶IV聚合酶 A. I + II B. I + III + IV C. II + III + IV D. I +II + IV + III 4 ( )限制性内切核酸酶的星活性是指： 在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。 活性大大提高 切割速度大大加快 识别序列与原来的完全不同 下列五个 DNA 片段中含有回文结构的是 A. GAAACTGCTTTGACB. GAAACTGGAAACTG C. GAAACTGGTCAAAG D. GAAACTGCAGTTTC 6 ( )关于cDNA的正确的提法是： 同mRNA互补的单链NA B同mRNA互补的DNA C以mRNA为模板合成的双链 D以上都正确 下列有关连接反应的叙述，错误的是 A. 连接反应的最佳温度为 37 B. 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10% C. 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM D. 连接酶通常应过量 2-5 倍 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是 A. 2 -OH 和 5 –PB. 2 -OH 和 3 -P C. 3 -OH 和 5 –PD. 5 -OH 和 3 -P ( )载体的功能是 A. 外源基因进入受体的搭载工具 B. 不能为外源基因提供整合能力 C. 不能提供复制能力 D. 不能为外源基因提供表达能力 10 ( ) 黏性末端连接法，不仅操作方便，而且 产生新切点 易于回收外源片段 载体不易环化 影响外源基因的表达 A质粒 B黏粒 C酵母人工染色体(YAC) Dλ噬菌体 12 ( )考斯质粒（cosmid）是一种 A. B. 由λ -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体 C.载体 D. 能在受体细胞内复制某一重组 DNA 的载体部分有两个 I 酶切位点。用 I酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的 I 酶切位点共有 A.4 个B. 3 个C. 1 个D. 2 个 ? A限制酶 B末端转移酶 C反转录酶 D DNA连接酶 15用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。 (a)Southem印迹杂交 (b)Northem印迹杂交 (c)Western印迹 (d)原位菌落杂交 三、简答题（每题5分，共25分） 1、简述获得目的基因常用的几种方法。 2、什么是α-互补筛选？ 3、简述酶切反应体系及反应条件？ 4、核酸操作的基本技术有哪些？ 5、限制性核酸内切酶有几种类型？常用是哪种类型并简述其特性。 四、论述题（每题10分，共40分） 1论述重组子的筛选和鉴定常用的方法。 2基因工程基本操作程序。 3试述5′RACE技术原理和方法 4试举例说明基因工程中为什么常用大肠杆菌作为工程菌？ 基因工程试题标准答案及评分标准B 一、选择题（每题1分，共15分） 1、D 2、A 3、A 4、D 5、D 6、C 7、A 8、C 9、D 10、C 11、C 12、B 13、D 14、C 15、C 二、名词解释（每题2分，共20分） 1、严格地说是指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程 2、质粒不亲和性：在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。 3、cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。 4、RACE：是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3，或5，端之间未知序列的方法。 5、基因文库：通过克隆方法保存在适当宿主中的某种生物，组织，器官或细胞类型的所有DNA片段而构成的克隆集合体