微生物遗传学.doc

第十一章 微生物育种（王钥天、余坦） (一)诱变育种 （1）原理：基因突变 （2）在实际中的应用：太空椒、太空番茄、辐照花卉，太空白莲，太空大豆“黑农五号”，青霉菌.等。 （二）杂交育种（重组育种）： （1）原理：基因重组 （2）在实际中的应用：杂交水稻、小黑麦、杂交苹果、杂交草莓，中国荷斯坦奶牛，丰鲤、荷元鲤、岳鲤、芙蓉鲤.等。 （三）基因工程育种 （1）原理：基因重组（或异源DNA重组） （2）在实际中的应用：优良品种的培育、DNA序列标记鉴别育种、基因芯片技术的应用等。 识记： 1.解释： 诱变育种：用物理和化学等因素，人为地对出发菌株进行诱变处理，然后运用合理的筛选程序及适当的筛选办法把符合要求的优良变异菌株筛选出来的一种育种方法 诱变因素：又称诱变剂，用来处理微生物并能提高生物体突变频率的这些物理或化学因素 基本培养基：仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基，成为基本培养基（MM），有时用符号“[ － ]”来表示。 完全培养基：凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或者半天然培养基，成为完全培养基（CM），有时用符号“[ + ]”表示。 营养缺陷型：野生型菌株经过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养（氨基酸，维生素，核酸等）的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长，成为营养缺陷型（auxotroph）。营养缺陷型是一种生化突变株，它的出现是由基因突变引起的。 温度敏感突变型：这是指仅在某个温度范围内显有与野生型不同表型的突变型。其中包括在某个温度以上显示出和野生型不同表型的高温敏感突变型，及在某个温度以下才显有与野生型不同表型的低温敏感突变.。 .有性杂交育种：有性杂交育种又称组合育种，它是通过人工杂交的手段，把分散在不同亲本上的优良性状组合到杂种中，对其后代进行多代培育选择，比较鉴定，以获得遗传性相对稳定、有栽培利用价值的定型新品种的育种途径。 准性生殖育种：是真菌在无性繁殖中的一种遗传性状虫性组合的过程；也就是说这种基因重组是营养细胞中进行而并非象性细胞在减数分裂过程中形成。 原生质体融合：指通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。 基因工程：是利用DNA重组技术，将目的基因与载体DNA在体外进行重组，然后把这种重组DNA分子引入受体细胞，并使之增殖和表达的技术。 载体：在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。 简单说明微生物遗传育种可以通过哪些途径进行？ 微生物遗传育种：从准性生殖的产物中可以获得较为稳定的重组二倍体和遗传稳定的重组单倍体 简单阐述微生物诱变育种的基本程序。 2.在发酵工业生产中，理想的生产菌种应具备哪些性状？ 3.在诱变育种时，出发菌株如何选择？对菌悬液有何 要求？ 4.归纳出：营养缺陷型这种突变株在微生物遗传育种中有哪些用途？ 答：（一）、营养缺陷型auxotroph 指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的合成培养基中增殖，必须补充一种或一种以上的营养物质才能生长。 （二）、营养缺陷型菌株的应用其在研究和实践中都有极其重要的意义。它可作为研究代谢途径和杂交、转化、转导、原生质体融合、质粒和转座因子等遗传规律所不可缺少的标记菌种；也可作为氨基酸、维生素、碱基等物质生物测定的实验菌种；在生产中，可直接用作发酵生产核苷酸、氨基酸等代谢产物的生产菌株；也可作为菌种杂交、重组育种和利用基因工程进行育种时所不可缺少的带有特定基因标记的亲本菌株。 5.诱变剂的选择应遵守哪些原则？ 6.诱变处理完后，通常采用哪些措施终止诱变的作用？ 答：通过漂洗等终止诱变的作用。 7.针对不同微生物，如何选择诱变剂和诱变剂量？ 筛选产量突变株时，应考虑哪些基本环节？： 9.试述筛选产量突变株的简便程序。 答：简便程序：琼脂块法、快速琼脂平板测定法。 10.营养缺陷型菌株的分离和筛选有哪些步骤？ 答;营养缺陷型菌株的分离和筛选步骤有：营养缺陷型的诱发、淘汰野生型、营养缺陷型的检出、营养缺陷型的鉴定。 11.淘汰野生型菌株的方法有哪些？分别简述其原理？ 答：（1）方法：抗生素法、菌丝过滤法、差别杀菌法和饥饿法等。 （2）原理：在诱变的存活菌体中营养缺陷型菌株的数量少，一般仅占存活菌株的百分之几或千分之几，而野生型细胞却大量存在，因而要采取一些措施，尽量淘汰野生型细胞，使缺陷型菌株得以富集，以利于检出。 12.在筛选营养缺陷型的过程中，首先需要对营养缺陷型进行浓缩。目前浓缩缺陷型的方法有哪些？它们的原理是什么？ 答：（1）方法（P156页）：菌丝过滤法、饥饿法、青霉素