广州大学生物工程酶工程作业2.docVIP

酶工程作业3 年级: 生工121班 学号: 1214200010 姓名: 何玉仪 回答以下问题: 试述固定化酶活力发生变化的原因。质量传递效应在其中所起的作用。 原因:①固定化过程中,酶分子空间构象会有所变化;②固定化后,酶分子空间自由度受到限制;③内扩散阻力使底物分子与活性中心接近受阻;④包埋时酶被高分子物质半透膜包围,大分子底物不能透过膜与酶接触.在大多数情况下酶经过固定化后其稳定性都有所提高,表现在热稳定性提高;对各种有机试剂及酶抑制剂的稳定性提高;对不同pH稳定性、蛋白酶稳定性、贮存稳定性和操作稳定性都有影响. 作用是:控制着反应速度. 试述固定化酶稳定性一般升高的原因。 固定化后酶分子与载体多点连接,可防止酶分子伸展变形;酶活力的释放是缓慢的;当酶与固态载体结合后,失去了分子间相互作用的机会,从而抑制酶的自降解,提高了酶稳定性. 什么是纤维素酶？从作用的形式看纤维素酶可以分为哪几类？试举二个例子说明纤维素酶的应用领域。 纤维素酶是将纤维素水解成葡萄糖的一组酶的总称.分类:①内切葡聚糖苷酶, 即Cx酶②外切葡聚糖苷酶, 即C1酶③ β一葡萄糖苷酶.应用:在酱油的酿造过程中添加纤维素酶,既可提高酱油浓度,改善酱油质量,又可缩短生产周期,提高产率. 固定化酶活力概念，表示方法和测量方法与一般天然酶有何显著差别？ 概念：催化某一特定化学反应的能力.表现方法:偶联率,相对活力,活力回收,半衰期.测量方法:间歇测定和连续测定.差别:固定化酶的活力一般比天然酶小,专一性也有所变化 举例分析为什么要进行酶的化学修饰． 适当的化学修饰是提高酶稳定性、解除其抗原性、改变酶学性质的一种重要手段 试述ＰＥＧ表面化学修饰的优点是什么？ 提高酶的抗蛋白水解能力,增加稳定性,延长半衰期;降低免疫原性和抗原性;毒副作用低 简述酶的主要功能基团的修饰方法。 氨基:卤代乙酸/磷酸吡哆醛/三硝基苯磺酸.羧基:碳二亚胺类特定修饰酶的羧基;巯基:有机汞试剂;对氯汞苯甲酸;5,5’-二硫-2-硝基苯甲酸;咪唑基:组氨酸咪唑基的修饰;酚基:四硝基甲烷在温和条件下对硝化酪氨酸酚基的修饰;吲哚基:色氨酸吲哚基的修饰;胍基:具有二个邻位羰基的化合物的精氨酸残基的修饰;甲硫基:经过氧化氢、过甲酸等可将硫醚氧化成甲硫氨酸桠枫. 进行羧基的化学修饰的最普遍方法是什么？写出其基本反应化学通式。从化学反应通式看，如果要改变修饰的效果，可以通过改变哪个基本来实现？常见的蛋白质氨基末端修饰剂包括哪些,写出其常见三种的化学通式。 水溶性的碳二亚胺类特定修饰酶的羧基成为最普遍的标准方法 衡量固定化酶及固定化技术优劣的主要指标是什么？ 相对酶活力;酶的活力回收率;固定化酶的半衰期 固定化酶方法的主要种类及其相互比较的特点是什么？ 特性 物理吸附法 离子结合法 包埋法 共价结合法 交联法 制备 易 易 易 难 难 结合力 中 弱 强 强 强 酶活力 高 高 高 中 中 底物专一性 无变化 无变化 无变化 有变化 有变化 再生 可能 可能 不可能 不可能 不可能 固定化费用 低 低 中 中 高 胰蛋白酶在人体胰脏中合成的时候有没有活力?这种刚刚合成时的酶的叫什么?它到了小肠后将发生什么变化才能起到消化食物的作用?这种变化的化学本质是什么？ 没有活力;胰蛋白酶原;在十二指肠部位接受肠激酶或胰蛋白酶的激活作用才能起到消化食物的作用;胰蛋白酶原受肠激酶或胰蛋白酶的激活作用从氨基端去掉一个酸性六肽后才具有活性. 植酸酶用在饲料中的主要作用是什么？为什么其用在饲料中还同时具有环境保护领域的意义？ 主要作用:植酸酶可使植酸磷降解成肌醇和磷酸,从而减少饲料中磷酸氢钙等无机磷的添加量,提高磷的利用率.此外能够提高饲料中矿物质、蛋白质和能量的利用率.原因:由于植酸酶能催化植酸及其盐类的水解,提高牲畜对磷的利用率因而在一定的程度上减少磷资源的浪费、降低磷排放所带来的污染,特别是对鱼类养殖中水环境的污染 影响蛋白质稳定性的主要因素有哪些?如何理解疏水性与蛋白质稳定性的关系? 金属离子、底物、辅因子和其他相对低分子质量配体的结合作用; 蛋白质-蛋白质和蛋白质-脂的作用; 盐桥和氢键; 二硫键; 对氧化修饰敏感的氨基酸含量较低; 氨基酸残基的坚实装配; 疏水相互作用. 关系:二者之间没有必然的联系 蛋白质稳定性的指标?热稳定性的衡量标准和稳定性的最有效指标是什么? 熔化温度;蛋白质伸展一半时的变性剂浓度/蛋白质自由能;最大稳定性温度;在特定温度下蛋白质功能活性维持时间.其中,熔化温度和蛋白质伸展一半时的变性剂浓度是预测酶稳定性的最有用参数 蛋白质失活有哪些可能的原因? 蛋白质水解酶和自溶作用、聚合作用、极端Ph、氧化作用