利用SeqMan进行序列拼接.docVIP

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  • 2017-02-08 发布于重庆
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利用SeqMan进行序列拼接

利用SeqMan进行序列拼接Step1:打开Seqman软件 Step2:加入你要拼接的序列 点击Add sequences 查找并选中要拼接的序列(可按住control键进行多选) 点击Add按钮填加选择的序列 填加完后点击done 注:最好用测序的图谱尽量不要直接用测序得到的序列 Step3:去除末端序列 主要是去除序列末端测序质量差或是载体序列 有两种方法可以用来去除这类末端序列 其一:利用Seqman自带的去除工具自动去除(利用Trim ends按钮进行) 其二:手工去除 个人感觉手工去除方法最有效,因此下边我们以后工去除为例进行演示 手工去除侧翼序列 双击要去除侧翼序列的目标序列 将鼠标放到测序图谱左边的一个黑色的竖线上,此时鼠标会变成一个有两个箭头的水平线 按住左键拖动黑竖线,那么你就会发现侧翼序列的颜色变浅,这部分变浅的序列则就被去除,不再参加后面的拼接 此步请将测序不准确或认为是载体的序列用这种方法去除。 测序准确的峰形图 峰形规则,一般在序列的中部,如下图所示 测序不准确的峰形图 峰形较乱,很难判断是哪个碱基,一般位于序列两端,如下图所示 Step4:进行序列拼接 点击Assemble按钮 在新出现窗口处点击拼接好的contig1 在出现的Alignment of contig1 窗口中点击左三角显示序列的测序图谱 点击菜单contig-strategy vi

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