毒理学实验__培训课件.pptVIP

四、步骤 动物选择：雌雄各半 剂量选择： 阴性、阳性对照，3-5个剂量组 高、中、低剂量组： 1/5、1/10、1/20 LD50 最高剂量组： 动物分组、编号、标记 动物染毒：环磷酰胺（阳性对照实验）腹腔注射，20mg/kg，每组2只鼠 染毒次数：两次或多次染毒，每天染一次 涂片、固定、染色： 脱臼处死?胸骨或股骨（股骨连接骨盆和小腿骨，取股骨保留股骨头和膝盖骨）?肌肉软组织用纱布包上去除?剪掉两端，移液枪吸血清（预热）1ml放离心管中?1ml注射器吸血清，镊子夹股骨冲洗骨髓细胞，1端冲洗3-5次，2端共冲洗6-10次?1000rpm离心10min?倒掉上清，留0.2-0.3ml上清?推片?晾干甲醇固定30-60s?吉姆萨染色10min 吉姆萨工作液：蒸馏水=1:9 染色缸50ml 染色后冲洗无细胞的一侧，显微镜观察PCE 镜检计数：PCE/NCE 200个 PCE微核率 1000个 五、结果、统计分析与结论 阴性？ 阳性？ 急性眼刺激试验 实验目的：掌握急性眼刺激试验原理、设计的基本方法、内容及思路，操作方法，了解刺激强度判断标准，结果判定。 实验原理：用于评价受试物对哺乳动物眼睛是否有刺激作用或腐蚀作用及其程度。将受试物滴入或涂入动物一侧眼结膜囊内，另一侧用赋形剂作为对照。在停止接触后的不