植物对逆境的生理响应(2013级)讲义.pptVIP

综合实验2 植物对逆境的生理响应 一、实验教学目的 了解植物体内脯氨酸含量测定的意义原理，掌握其测定方法。 掌握蒽酮法测定可溶性糖的原理和方法。 进一步认识细胞膜系统的结构和功能，掌握电导率仪法测定离体植物叶片的抗逆性的原理与方法。 通过高温和低温处理对生物膜的伤害，加深理解不良环境对植物造成的伤害。 综合实验2 植物对逆境的生理响应 二、实验意义 植物生长过程中经常会遇到干旱、低温、淹水、热害、盐碱、病虫害等不良环境(逆境)。植物有多种抵抗逆境的形态和生理机制。在生理上，植物可以通过维持细胞膜的完整性，增加脱落酸含量，积累渗透调节物质，活性氧平衡、抗逆基因的表达等方式来提高植物细胞对逆境的抵抗力。其中不良环境对植物组织的伤害程度常通过测定细胞膜的通透性来衡量，而渗透调节物质脯氨酸、可溶性糖含量的变化是植物抗逆能力强弱的一项重要生理指标。 逆境的种类 渗透调节是每个细胞溶质浓度的净增加，而不是由于细胞失水、体积变化引起的溶质相对浓度的增加。 综合实验2 植物对逆境的生理响应 三、实验基本原理 在酸性条件下，脯氨酸与茚三酮反应生成稳定的红色缩合物，用甲苯萃取后，此缩合物在波长520 nm处有一最大吸收峰。脯氨酸浓度在一定范围内与其消光度成正比。 综合实验2 植物对逆境的生理响应 三、实验基本原理 可溶性糖在硫酸作用下生成糠醛或羟甲基糠醛化合物，糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮作用形成蓝绿色络合物(糠醛衍生物)，在一定波长范围内，其颜色的深浅与糖含量有定量关系，在625 nm波长下的吸光值与可溶性糖含量成正比。 综合实验2 植物对逆境的生理响应 综合实验2 植物对逆境的生理响应 三、实验基本原理 植物组织受到逆境伤害时，由于膜的功能受损或结构破坏透性增大，细胞内各种水溶性物质不同程度的外渗，将植物组织浸入无离子水中，水的电导率将因电解质的外渗而加大，伤害愈重，外渗愈多，电导率的增加也愈大。故可用电导率仪测定外液的电导率值而得知伤害程度，从而反映植物的抗逆性强弱。 综合实验2 植物对逆境的生理响应 四、仪器试剂 （一）植物体内游离脯氨酸含量的测定 （309实验室） 1、实验组 玻璃仪器：(1)试管8根　(2) 弯颈漏斗4个　(3)移液管6根 试剂：(1) 3%磺基水杨酸　(2)甲苯 (3)冰乙酸　 (4) 2.5% 茚三酮　　　　　　　 综合实验2 植物对逆境的生理响应 四、仪器试剂 （一）植物体内游离脯氨酸含量的测定 （309实验室） 2、标准曲线组 玻璃仪器： (1)试管7根 (2) 移液管7根　 试剂： (1)10ug/ml脯氨酸　 (2) 2.5% 茚三酮　 (3) 蒸馏水　(4) 冰乙酸　(5)甲苯 综合实验2 植物对逆境的生理响应 四、仪器试剂 （二）蒽酮法测定植物组织中可溶性糖的 含量（310实验室） 1、实验组 玻璃仪器：(1)试管8根　(2)烧杯和漓管　(3)100ml容量瓶4个 (4) 漏斗4个(5) 弯颈漏斗4个　 试剂：(1) 0.1% 蒽酮－硫酸水溶液　(2) 蒸馏水 综合实验2 植物对逆境的生理响应 四、仪器试剂 （二）蒽酮法测定植物组织中可溶性糖的 含量（310实验室） 2、标准曲线组 玻璃仪器：(1)100ml容量瓶6个　(2) 试管7根　 (3) 50ml量筒2个　(4) 移液管5根 试剂：(1) 0.1% 蒽酮－硫酸水溶液　(2) 200μg/ml葡萄糖 （3） 蒸馏水　 综合实验2 植物对逆境的生理响应 四、仪器试剂 （三）电导率仪法测定离体植物叶片 的抗逆性（309、310实验室） 玻璃仪器：50 ml三角瓶4个　 试剂：蒸馏水 综合实验2 植物对逆境的生理响应 五、实验材料 1、水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、蓖麻、烟草、向日葵等农作物叶片； 2、黄瓜、茄子、辣椒、豆角、大白菜、萝卜等蔬菜绿叶、心叶、菜心、菜帮等； 3、八仙花、红叶石楠、大叶黄杨、海桐、木芙蓉、紫荆、珊瑚树等园林植物叶片； 4、枫香、木荷、梧桐、泡桐等林木叶片。 综合实验2 植物对逆境的生理响应 六、实验设计 学生自带玉米、烟草、羊蹄等植物材料利用实验室条件人为设置逆境与正常条件形成对照（如高温与常温，低温与常温，干旱与保湿等），分析逆境对以下生理指标的影响： （一）植物体内游离脯氨酸含量 （二）植物组织中可溶性糖的含量 （三）植物组织外液电导率值 综合实验2 植物对逆境的生理响应 六、实验设计 1、考察旱涝对上述生理指标的影响； 2、考察冷热对上述生理指标的影响； 3、考察盐碱对上述生理指标的影响； 4、考察病