分子生物学第11.5章原核基因转录水平的调控教材分析.ppt

11.5 原核基因转录水平的调控 组成型表达和调节型表达 真核与原核细胞转录与翻译调控特点的比较 转录水平上的调节方式 1.代谢产物对基因表达的调节 2.衰减子对基因表达的调节 3.降解物对基因表达的调节 降解物对基因表达的调节 4.细菌的应急反应 细菌的应急反应 原核基因启动子的一般结构 几种原核基因的启动子 原核生物的RNA聚合酶 大肠杆菌RNA聚合酶 大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的功能 RNA的转录过程 RNA的转录过程 转录起始过程 RNA的转录过程 RNA的转录过程 终止子的类型 ρ-非依赖性终止子 ρ-非依赖性终止机制 ρ-依赖性终止子 ρ依赖性终止机制 终止子的终止效率 Rut 位点的序列特征 乳糖操纵子 lac A 的可能作用 乳糖操纵子的表达调控 乳糖操纵子的表达调控 乳糖操纵子的人工诱导物和底物 乳糖操纵子的人工诱导物和活性测定底物 乳糖操纵子的发现 Effect of Cryptic Mutant （lzcY－）on Accumulation of Galactoside 对突变体的生物化学研究 对突变体的遗传学研究 Mutant repressor gene（I－） 对突变体的遗传学研究 Mutant operator（O c） 对突变体的遗传学研究 对突变体的遗传学研究 乳糖操纵子概念的提出 lac repressor的纯化 lac repressor与operator的结合 Assaying the binding between lac operator and lac repressor The Oc lac operator binds repressor with lower affinity than does the wild-type operator Pastan等的实验 转录起始开放复合物的形成 Straney和Crothers的实验 Krummel和Chamberlin的观点 Lee和Goldfarb的实验 Lee和Goldfarb的实验结果 The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1965 乳糖操纵子的阻遏调控 乳糖操纵子的阻遏调控 乳糖操纵子的阻遏调控 Operator 的结构 乳糖操纵子的三个Operator 乳糖操纵子的三个Operator缺失对基因表达的影响 阻遏蛋白四聚体结合到两个operator上使DNA成环 乳糖操纵子表达中的葡萄糖效应 Inducer Exclusion 葡萄糖抑制乳糖输入 乳糖操纵子表达中的葡萄糖效应 乳糖操纵子表达中的葡萄糖效应 乳糖操纵子启动子上CAP与RNA聚合酶的顺序结合 乳糖操纵子启动子上的CAP结合位点 CAP与结合位点结合后使DNA发生弯曲 负调控和正调控 调节蛋白的几种作用方式 调节蛋白的几种作用方式 色氨酸操纵子 色氨酸操纵子的组成 色氨酸操纵子的结构 色氨酸操纵子的调控机制 色氨酸操纵子的阻遏系统控制 色氨酸操纵子的阻遏系统控制 色氨酸操纵子的衰减子调控 衰减子的功能 衰减子结构特点 衰减子结构特点 衰减子的作用机理 衰减子的作用机理 除了抑制乳糖吸收外，葡萄糖还通过另一种机制阻止乳糖操纵子表达。PTS中的II AGlc在磷酸化状态时刺激腺苷酸环化酶的活性，使ATP转变成cAMP，当介质中有葡萄糖时，II AGlc在输入葡萄糖的过程中，本身被脱磷酸化，脱磷酸化的II AGlc降低腺苷酸环化酶的活性，使cAMP减少。而cAMP也是乳糖操纵子表达的必需因子。这是乳糖操纵子表达的另一种调控机制。 cAMP可与其受体蛋白CAP（catabolite activator protein，也叫cyclic AMP receptor protein，CRP）结合，形成复合物，结合到乳糖操纵子的启动子区域，从而使得RNA聚合酶能够与启动子结合，转录得以进行。没有cAMP－CAP复合物与启动子的结合，RNA聚合酶不能结合到启动子上。 很多操纵子的转录需要cAMP－CAP复合物的参与，尤其是那些－10和－35序列保守性不强的启动子。 In negative regulation a repressor protein binds to an operator to prevent a gene from being expressed. In positive regulation a transcription factor is required to bind at the promoter in order to enable RNA polymerase to initiate transcription. 色氨酸操纵子负责色氨酸的