现代生物技术制药工艺学要点.ppt

连接酶 ku 活性形式 还原剂 辅酶 平末端 突出端 DNA RNA ss DNA RNA与RNA 切口补平℃ T4 DNA连接酶 62 单体 ＋ ATP，Mg ＋， 15～25℃ ＋ 4℃ ＋ — － 37 大肠杆菌DNA连接酶 77 聚体 － NAD+ Mg － ＋ 10～15℃ － － － 37 热稳定性连接酶 ? ? ＋ NAD+ Mg － ＋ 24～37℃ － － － 65～72 T4 RNA连接酶 47 单体 ＋ ATP， Mg － － － ＋ ＋ ? 连接酶的各种特性 四、DNA聚合反应与聚合酶 DNA聚合酶：催化DNA分子进行体外合成反应，与体内相似，一般需要模板，合成产物为模板的互补序列。根据聚合酶依赖的模板，可分为： 依赖于DNA的DNA聚合酶：大肠杆菌DNA聚合酶I及其大片段、T4和T7 DNA聚合酶及热稳定性DNA聚合酶； 依赖于RNA的DNA聚合酶：反转录酶。 不依赖于模板的聚合酶：能把核苷酸加到DNA分子的末端，即末端转移酶。 依赖于DNA的RNA聚合酶： 热稳定性DNA聚合酶和反转录酶已在相关节介绍。 酶 ku pH 温度℃ 延伸速度 加工性能 模板 聚合酶活性 外切酶活性 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ 109 7.4