第五章蛋白质组与新药开发教材分析.ppt

三、生物技术药物的开发 生物技术药物包括： 基因工程重组蛋白质药物 寡核苷酸药物 基因工程抗体药物 DNA药物等 生物技术药物发展的主要动力： 来源是基因组和蛋白质组的研究。 其中最令人注目的进展是抗体药物。 抗体是机体抵抗病原体的主要防御系统。 它们是由免疫系统自主产生的蛋白质。 每个抗体都可特异性地识别作为抗原靶分子的特征，哪怕是极其微小的差别。 目前，大多数抗体药物都是鼠人嵌合体抗体或人源化抗体。 由于传统的产生抗体方法是基于鼠的免疫机制，来源是鼠类，因而临床易发生免疫排斥反应。 针对这一问题，CAT生物技术公司正在利用蛋白质组学独特的技术体系，以及组合噬菌体抗体文库(combinatorial phage antibody librarys)，加上后基因组学的一些技术，开发能够成为今后人类治疗药物的人源抗体。 随着后基因组时代的到来和科学技术尤其是蛋白组学、生物信息学等的发展。 蛋白组学在药物开发中的作用会越来越明显 通过蛋白质组学开发出的药物也会逐渐深入到人们的生活中去。 在肿瘤研究和诊治方面，Wang等将5766种cDNA点布在一张基因芯片上，用它检测正常卵巢组织和卵巢肿瘤之间各基因表达的差异。 鉴定了在卵巢癌变过程中起着重要作用的几种基因，这也为肿瘤的诊断和治疗带来了新的方法和途径。 另外还有多种癌症组织被人们用这种方法所研究，这些肿瘤基因表达谱的研究对于肿瘤的分类和提供癌症的新型基因靶标提供了可能。 近年来，随着分子生物学的不断发展，越来越多的单基因遗传病的基因被克隆出来。 利用基因芯片检测容量大的特点，可根据某个遗传病的特定基因，设计一组包含能检测该基因各外显子上所有可能出现突变的DNA序列位点的寡核苷酸探针，制成一张芯片。 利用杂交时会出现碱基错配杂交信号减弱的特性，经计算机分析扫描信号，将该基因上的杂合性突变检测出来， 并分析出该突变位点在突变后有无mRNA表达、表达后翻译的蛋白质功能变化的可能情况。 使得一次检测就可以完成对一系列疾病的基因诊断。 单张芯片上容纳的寡核苷酸探针越多 一次检测能够诊断的基因遗传病种类也越多。 随着基因芯片产量的增加，价格也会逐步下降，使得对基因遗传病的诊断和产前诊断在实际中的应用成为现实。 二、蛋白质芯片 蛋白质芯片又称蛋白质微阵列(protein microarray) 蛋白质芯片是继基因芯片之后，作为基因芯片功能的补充发展起来的。 DNA基因芯片为描绘不同组织的mRNA表达谱提供了可能，并且得到了广泛的应用。 一个基因在转录时也许以多种mRNA形式剪接 而同一种蛋白质可能会以多种形式进行翻译后修饰， 蛋白质组中蛋白质的数量可能超过基因组的数量。 所以更能反映生物体机能的是蛋白质表达谱，而不是mRNA表达谱。 蛋白质芯片的发展使得在同一时相分析整个蛋白质组成为可能。 蛋白质芯片的两种常用的分离手段： （1）保留色谱 （2）预活化芯片表面 用于蛋白质芯片表面的色谱主要有： 反相色谱 离子色谱(阴离子和阳离子)交换色谱 金属亲和色谱等 预活化表面主要是基于蛋白质之间的专一性作用。 如：抗原一抗体结合和受体一配基等。 通过分离，可以将从细胞或体液中分离出的具有某些共同特性的蛋白质富集至蛋白质芯片上用于进一步的分析。 蛋白质芯片的概念： 与基因芯片相似，蛋白质芯片就是在载体上点布高密度不同种类的蛋白质， 然后再用标记了荧光染料的已知抗体或配体等与待测样本中的抗体或配体一起同芯片上的蛋白质竞争结合， 在扫描仪上读出荧光强弱， 利用计算机分析计算出待测样本结果。 在此基础上进一步发展到对各种蛋白质、抗体以及配体的检测，弥补了基因芯片检测的空缺。 从而在SELDI-TOF-MS中获得比普通MALDI-TOF-MS信号更强(灵敏度更高)、更均一、重复性更好的谱图，进行蛋白质的相对分子质量和相对定量分析。 与DNA芯片一样，蛋白质芯片同样蕴涵着丰富的信息量，必须利用专门的计算机软件包进行图像分析、结果定量和解释，才能应用于疾病靶标蛋白质的发现与筛选研究。 目前我国在生物芯片研发及生产技术、应用等方面已经取得了很大的成功。 世界首例用于肿瘤早期检测的多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统， 日前已在上海数康生物科技有限公司开发研制问世， 经多家医院临床试验和备方专家论证鉴定， 国家药品监督管理局已正式为其颁发了生物制品一类新药证书及试生产批文。 这一系统是基于生物芯片技术和免疫学技术 通过检测12种肿瘤标志物 可以达到对10种常见肿瘤: 原发性肝癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、卵巢癌、子宫内膜癌、结／直肠癌、乳腺癌 进行同时检测的目的，可广泛地应用于临床辅助诊断、体检普查等领域。 第三节 药物