第五章细菌和病毒的遗传分析教材分析.ppt

第一节 细菌与噬菌体的突变型 第二节 细菌的遗传与做图 大肠杆菌的Hfr菌株与营养缺陷型的F-菌株杂交，利用中断杂交实验得到以下实验结果： 供体的基因不同的Hfr品系及进入的时间（分钟） （1）试用上述结果建立一个大肠杆菌的染色体图（以分钟表示距离）。 （2）在图上标出菌株中F因子插入的位置和方向。 一个非溶源性菌株带a+和b+基因受到噬菌体的感染，然后用新的噬茵体感染一带ab基因的溶源性细菌菌株，实验结果如下：8ab+和7a+b，585a+b+，问a和b连锁吗?如果连锁，计算a和b的连锁强度。 本实验是一个共转导实验，在转导子中，a+b+的共转导频率=585/(585+8+7)×100%=97.5% 由于共转导频率非常高，所以a与b基因为连锁基因。 利用普遍性转导进行两点或三点转导实验作图，需筛选出一个供体标记的转导子，即通过转导而能表达外基因子的受体细胞，再分析其他供体标记的存在状况。如从一供体为a+ b+ 转导给a– b– 受体，转导会产生a+ b–、a– b+ 和a+ b+ 转导子，若选择a+ 转导子作为供体标记， 则a – b间重组率为： RFab = (a+ b–)∕[(a+ b–) + (a+ b+ )] × 100 % ； 若选择b+ 转导子作为供体标记，则a – b间重组率为： RFab = (a– b+ )∕[(a– b+ ) + (a+ b+ )] × 100 %。 所以，如果选择a+ 转导子作为供体标记，则此时a – b间重组率为：1.18%；若选择b+ 转导子作为供体标记，则a – b间重组率为：1.34%。 第三节 噬菌体的遗传与做图 在沙门氏菌的组氨酸合成中，许多不同的突变(A—D)由于阻碍某一酶的产生而影响组氨酸合成的某一步骤，这些突变菌相互结合产生野生型的重组子的资料如下： (+可以产生重组子，0不产生) 突变菌株 A B C D A 0 + 0 + B 0 0 0 C 0 + D 0 a）设想哪些突变可能是缺失引起的，画出此缺失区域的图。 b) 如果一个突变能与除C外的所有突变菌株产生野生型重组，那么它可能在此图的什么位置上? 实验表明： T4颗粒的装配是循着严格规定的形态发生途径进行的。所以，控制形态发生，编码结构蛋白的晚期基因的表现完全依赖于控制DNA复制等的早期基因正常功能的行使。 突变噬菌体之间的互补作用检测 结论说明： 在互补测试中，如果两个隐性突变表现出互补效应，则证明这两个突变型分别属于不同的基因； 如果两个隐性突变不表现出互补效应，则证明这两个突变型属于同一个基因。 顺反子（cistron）： 不同突变之间没有互补的功能区的一个区段称为顺反子。即功能水平上的基因。 基因内互补（intragenic complementation） 同一基因内两个不同位点突变使两条原来相同的多肽链转变成两条分别在不同位点上发生变异的多肽链，而后这两条多肽构成双重杂合子，表现出不同的恢复酶活性部位，这种现象称为基因内互补。 第四节 缺失作图 点突变（point mution）:由于核苷酸对发生改变所造成的突变称为点突变。 缺失突变（deletion mution）:由于缺失了许多相邻的核苷酸对所造成的突变称为缺失突变。 点突变 单个位点的突变； 可以发生回复突变； 点突变与点突变之间可发生重组。 缺失突变 多个位点的突变； 不可发生回复突变； 同另一基因组内缺失区的点突变之间不可能重组。 缺失作图（deletion mapping)的原理： 缺失突变同另一基因组内缺失区的点突变之间不可能重组。 反之，缺失突变如不能与一待测点突变发生重组，则说明该突变与点突变位于同一区域；如缺失突变如可以与一待测点突变发生重组，则说明该突变与点突变不位于同一区域。 缺失作图方法： 0.5ml大肠杆菌B菌株 + 1滴缺失型噬菌体 + 1滴待测r Ⅱ突变噬菌体 几分钟后 滤纸 大肠杆菌 K（入） 在纸条覆盖的区域内出现阳性反应： 说明两突变体之间能发生重组； 如果在纸条覆盖的区域内出现阴性反应： 说明两突变体之间不能发生重组。 （重组体低于0.00001) 空白对照中出现的噬菌斑点突变的回复突变型产生。 (二）局限性转导（restricted transduction) 专一性转