第14章经典液相色谱1技术总结.ppt

第一节 柱色谱法p231 一、液-固吸附柱色谱法 二、液-液分配柱色谱法 三、离子交换柱色谱法 四、空间排阻柱色谱法 一、液-固吸附柱色谱法 Adsorption Chromatography (三) 吸附剂的选择和吸附活度： 1. 吸附剂：高比表面积的多孔性物质 常用的有：硅胶、氧化铝、聚酰胺等。 (1) 硅胶：硅羟基，分离弱酸和中性物质(如有机酸、氨基酸、甾体等)。 酸性pH 4 ～ 5 分离酸性物质. 如氨基酸 (2) 中性pH 7 氧化铝 分离生物碱. 如挥发油等 碱性pH =9～10 分离碱性. 如生物碱 吸附能力稍强于硅胶。 活度级数 含水量 活度 吸附能力 小 少 大 强 大 大 小 弱 1. 被测物质极性: 基本母核相同 基团极性↑ 分子极性↑ 极性基团数↑分子极性↑ 分子双键数↑，共轭度↑，分子极性↑ 取代基空间排列 二、液-液分配柱色谱法Partition chromatography （一）原理：利用各组分在两相中溶解度不同而达到分离。 K=Cs/Cm s、m均为液体 * 第14章 经典液相色谱法 第一节 柱色谱 第二节 平面色谱法 固定相：吸附剂（硅胶或Al2O3） 表面的吸附中心 如 硅胶表面的硅羟基 固定相 流动相 （一）分离原理 分离机制： 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离 吸附→解吸→再吸附→再解吸→无数次洗脱→分离 注：K与组分的性质、吸附剂的活性、流动相的性质 及温度有关 组分 极性 吸附力 溶解度 冼脱次序 1 大 强 小 后 （二）吸附等温线（p235） 一定温度下，某组分在吸附剂表面吸附达平衡时，该组分在两相中的浓度相关曲线 凸型 拖尾峰 固定相表面吸附中心活性不同，K不同，先占据强吸附中心，饱和后，再占据弱的→K随浓度增大而减少 凹型 前沿峰 浓度大，表面性质变，K大 直线型 对称峰 吸附剂表面没被饱和 低浓度，线性 K一定，与溶质浓度无关 样品量大，超载。常见 2.吸附剂的活度（Ⅰ～Ⅴ）(p313表14-1) 水分占据吸附中心。 活化：105～110℃加热除水为活化，吸附力加强。 脱活：加一定水份，降低活性，吸附力减弱。 (四) 色谱条件 (p314图14-8) 物质极性 吸附剂活度 流动相极性 大 小 大 小 大 小 实验确定最佳条件 流动相 常见化合物极性： 烷烃 烯烃 醚类 硝基化合物 二甲胺 脂类 酮类 醛类 硫醇 胺类 酰胺 醇类 酚类 羧酸类 一般，物质极性、吸附剂活性固定，只可选流动相极性。 常用流动相极性强弱顺序: 石油醚 环己烷 四氯化碳 苯 甲苯 乙醚 氯仿 醋酸乙酯 正丁醇 丙醇 乙醇、甲醇 水 相似相溶的原则 2.流动相极性: K与组分的性质、流动相和固定相的性质以及柱温有关 K↑,固定相中↑，流动相中↓ （二）载体和固定相 载体（担体）：惰性物质，较大的比表面积，常用硅胶、纤维素、 硅藻土。 固定相(固定液): 常用水、甲酰胺 （三）流动相 与固定相互不相溶的有机溶剂。可以单一也可混合液。如：石油醚、 醇类、 酮类、酯类、卤代烷烃。（流动相需先用固定相饱和，否则固定相易流失。） Note：防止固定液的流失, 常采用化学键合相。 *