TCBS琼脂培养基对致病菌的检测分离.doc

　　品种名称：TCBS琼脂 (硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆盐、蔗糖琼脂) 　　品种编号：025020 　　TCBS琼脂用途：用于肠道致病性弧菌特别是霍乱弧菌和副溶血性弧菌的选择性分离培养。 　　在自然情况下，人类是霍乱弧菌的唯一易感者。在地方性流行区，除病人外，无症状感染者也是重要传染源。高比例的无症状携带者有利于疾病的扩散，根据卫生状况，无症状携带者和病人的比率波动在10:1～100:1之间。 传播途径主要是通过污染的水源或未煮熟的食物如海产品、蔬菜经口摄入。居住拥挤，卫生状况差，特别是公用水源是造成暴发流行的重要因素。人与人之间的直接传播不常见。在正常胃酸条件下，如以水为载体，需饮入大于1010个细菌方能引起感染;如以食物作为载体，由于食物高强度的缓冲能力，感染剂量可减少到102～104个细菌。任何能降低胃中酸度的药物或其他原因，都可使人对霍乱弧菌感染的敏感性增加。　　TCBS琼脂使用原理： 　　多价蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可刺激弧菌的生长;蔗糖是可发酵的糖类;胆酸钠、牛胆汁粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长;硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂;溴麝香草酚蓝和麝香草酚蓝是pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。 　　TCBS琼脂配方(每升)： 　　酵母膏粉5g 　　多价蛋白胨 10g 　　氯化钠10g 　　柠檬酸钠10g 　　硫代硫酸钠10g 　　胆酸钠 3g 　　牛胆汁粉 5g 　　蔗糖20g 　　柠檬酸铁 1g 　　琼脂15g 　　溴麝香草酚蓝0.04g 　　麝香草酚蓝0.04g 　　最终pH 8.6±0.2 　　TCBS琼脂使用方法： 　　1、称取TCBS琼脂培养基89g，加入蒸馏水或去离子水1 L，加热搅拌煮沸1—2min溶解后，勿高压灭菌，冷至50左右，倾注灭菌平皿，待凝固后备用。 　　2、取待检菌的新鲜纯培养物划线接种于平板上，36±1℃培养18—24h。 　　质量控制： 　　此培养基倾注平皿冷却后呈绿色，无沉淀。下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h，结果如下： 　　菌 名 　　　　　菌 号 　　　生长状况　　 菌落特征 　　霍乱弧菌　　　　Vb0　　　　　 好 　　　　黄色 　　副溶血性弧菌 　VPL4-90　　　　好 　　　　蓝绿色 　　大肠埃希氏菌　ATCC25922　　不长或差 　　半透明 　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。 　　规 格：250g 食品检测