Trizol提RNA的方法.docVIP

1.关于Trizol的购买：目前市面上买的大多是100ml装的，比较出名的是Invitrogen公司的Trizol，100ml原装的据说要1200大洋以上，不过有一种据说香港分装的，只需600元，但是相对国产品牌三四百元的价格还是贵了一些。国产很多公司都有类似的Trizol试剂，价格大多三百多元，成分都差不多，可以说都是invitrogen的山寨产品。比如我用的是北京一家公司的，四百多，做出来也还不错。Takara有一款专门提取small RNA的trizol，好像贵一些。2.关于配套试剂：Trizol法提取RNA是要用到氯仿、异丙醇和乙醇的。氯仿现在是违禁品，不大好买（我们学校试剂科现在不卖），所以买的时候要让试剂上给送，一般他们都能免费给送。氯仿遇光易分解，试剂商给你的时候应该是遮光的。异丙醇虽然没有特殊说明，但我查的据说也是最好避光保存，不过这种试剂都是棕色瓶子，能遮蔽大部分的光线了。3.关于实验时的防护：RNA很容易降解，所以实验时一般都要求口罩帽子的，避免组织的污染。不过以我的经验，好像内源性的RNA酶才是最主要的，也就是组织内本身的RNA酶。开始我是很小心，口罩手套帽子的，但是提取出来发现还是降解了，后来有经验了，即使组织掉在地上，拿回去继续提也没问题（前提是不能化冻）。所以最最重要的是组织在液氮研磨成粉末并加Trizol 之前不能化冻，这也是fas