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链霉菌室实验操作手册（2003年） 第一章 培养基 抗生素 生长因子 3 常用抗生素及其使用浓度 3 LB（Luria-Bertani）培养基 3 LA 3 基本培养基（MM） 3 R5（1L）链霉菌原生质体转化时用 4 YEME(酵母膏-麦芽膏培养基) 1L（液体培养链霉菌） 4 TSBY （1L）（液体培养链霉菌） 4 MS培养基 5 2CMY培养基（用于井岗的接合转移） 5 YMS培养基（阿维，井岗产孢） 5 YD培养基 5 生长因子补充物的使用浓度 5 第二章 DNA基本操作 7 大肠杆菌质粒的抽提 7 酶连反应 7 DNA片段凝胶回收 7 DNA纯化 9 E.coil总DNA的提取 9 链霉菌质粒DNA的小量提取（还需改进） 10 去磷酸化处理（详见分子克隆实验指南以及Takara的CIAP使用说明） 10 AT克隆（详见说明书） 10 Southern Blot 11 第三章 PCR及相关技术 13 PCR 13 PCR重组（详见《PCR技术实验指南》p429 重叠延伸技术） 14 PCR定点诱变（DpnI法） 14 第四章 基因片段转移技术 15 大肠杆菌CaCl2法制备感受态细胞及DNA转化 15 DNA转化 15 大肠杆菌质粒的快速检测 15 接合转移（详见英文《手册》249页） 16 链霉菌原生质体的制备 16 链霉菌原生质体的转化 17 PCR-Targ