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- 2017-02-10 发布于河南
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生物人教版选修1课时检测十三多聚酶链式反应扩增DNA片段Word版含解析
课时跟踪检测十三 多聚酶链式反应扩增DNA片段
(满分50分 时间25分钟)
一、选择题(每小题3分,共24分)
1.下列有关PCR技术的叙述,不正确的是( )
A.PCR技术利用的是碱基互补配对原则
B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等
C.PCR技术需在体内进行
D.PCR技术可分为变性、复性、延伸三个阶段
解析:选C PCR技术是聚合酶链式反应的简称,是在体外快速大量复制DNA片段的一种新技术。
2.PCR一般要经过三十多次循环,从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时将( )
A.仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸
B.与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸
C.同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延伸
D.无需与引物结合,在酶的作用下从头合成子链
解析:选B 当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时,此单链引物端为5′端,因此与它互补的子链应从另一端开始合成,即与引物Ⅱ结合延伸DNA的子链。
3.在PCR扩增实验中,引物是很重要的。下列属于引物特点的是( )
①引物长度一般是80~100个碱基对(bp)为宜
②DNA聚合酶能从引物的5′端开始延伸DNA链
③引物是一小段DNA或RNA
④引物能与DNA母链的一段碱基序列互补配对
A.①② B.③④
C.①③ D.②④
解析:选B 引物长度一般以20~30个碱基对(bp)为宜,包括引物Ⅰ和引物Ⅱ两种。引物太短或太长,都可能降低产物的特异性。引物是一小段DNA或RNA,它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对;DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3′端延伸DNA链,当引物与DNA母链结合后,DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链。
4.在PCR扩增DNA的实验中,根据设计,一分子DNA经30次循环后,应得到约230个DNA分子,但结果只有约210个DNA分子。出现该现象的原因可能是( )
①循环次数不够
②Taq DNA 聚合酶活力不够或其活性受到抑制
③引物不能与母链结合
④系统设计欠妥
A.①②③ D.①②④
C.①③④ D.②③④
解析:选B 解答本题应从PCR扩增过程的条件进行分析:
①循环次数过少,产物的量比预期的少;
②Taq DNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制,导致催化效率降低,得到的产物比预期的少;
③如果引物设计不合理,则无法进行扩增;
④PCR系统设置不妥,达不到预期的效果。
5.下列有关PCR技术的叙述,不正确的是( )
A.聚合酶链式反应,是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术
B.在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C.PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行,只需提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸即可
D.PCR一般经历三十多次循环,每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段
解析:选C PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行,需提供DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
6.右面为DNA变性和复性示意图,下列相关说法不正确的是( )
A.向右的过程为加热(80~100 ℃)变性的过程
B.向左的过程是DNA双链缓慢降温复性
C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同
D.图中DNA片段共有2个游离的磷酸基、2个3′端
解析:选C DNA体外的变性同体内的解旋实质是相同的,都是使氢键断裂,DNA双螺旋打开,只是体内需解旋酶,体外是高温条件。
7.复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度冷却至40~60 ℃,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括( )
A.由于模板DNA比引物复杂得多
B.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞
C.加入引物的量足够多而模板链数量少
D.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合
解析:选D 复性的原理是碱基互补配对,解旋后DNA分子变成单链,碱基序列未发生改变,冷却后仍可以进行复性。
8.“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子,如图2所示,其中第⑤种DNA分子有几个( )
图1
图2
A.2 D.4
C.6 D.8
解析:选D PCR技术扩增时,由两种引物决定所扩增的片段的特定序列,上一次循环的产物为下一次循环的模板。第一次循环形成①和②,第二次循环形成①②③④四个DNA,以此类推4次循环后共形成16个DNA,其中①②各一个,③④各三个,⑤共
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