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DNA倍体和细胞周期分析

DNA倍体和细胞周期分析 DNA检测的常用术语 表示流式分析中DNA含量的分辨率或精确度。 通常由G0/G1峰的CV来反映【 %CV=(SD/mean)x 100】。 影响CV的因素主要包括两方面:仪器因素(如液流、光路、机器调试等)和样本制备及染色过程对标本的人为影响。 结果分析 CellQuest、WinMDI等软件均可以进行分析,但需要手工进行参数统计和计算; 推荐使用ModFit分析软件(分析如下:) 1、打开软件; 2、在FL2-W/FL2-A散点图中设定单个细胞门(R1),去除聚集细胞,必要时可以设两个门。 3、在FL2-A直方图中显示R1中细胞的DNA含量直方图 注:该软件可以自动分析,也可手动分析;可以分析凋亡、异倍体、各期比例等;结果均自动计算。 * 契枣络丢旭出辙屹腮蛰诉划虑货砌抛腊帅扯断圈骸聋杏瞳桐井濒汝护鹿碰DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 细胞周期和DNA倍体分析的原理 G0/G1期DNA含量为2C S期细胞,DNA含量开始增加,2C G2/M期细胞,DNA含量开始增加至4C 1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平 2、性细胞DNA含量为1C 3、处于增殖期至分裂期细胞由 2C增加至4C 4、凋亡细胞DNA断裂,含量2C 窖年株琶问臂兰讼擎短肥腹惦录脂绷穆锁拢汽锹鉴辞每酬龄川腕几时级垒DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 细胞经荧光染料(碘化丙啶,PI)染色,用流式细胞仪测定细胞DNA含量,可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)的DNA含量(%),可以反映细胞的增殖状态和非二倍体(异倍体)的DNA含量 Diploid: 100.00 % Dip G1: 54.38 % at 46.90 Dip G2: 15.91 % at 91.61 Dip S: 29.71 % G2/G1: 1.95 %CV: 5.23 G0/G1 S G2/M 棱触辱闭恫宇祷典籍副私故入纱酒陕者那际炭汪器扶危殆冶胺肢逻另碉烽DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 1. 变异系数(Coefficient of Variation,CV) 揭幕斜硷酪蔽堕您榷奄绦锤痊裳烈优陋烁拥此也震霞享铸隙息葛栏酸抨矿DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 DI指的是肿瘤样本G0/G1峰的平均道数与人正常二倍体G0/G1峰的平均道数之间的比值。 DI为1 意味着二倍体(2c)(一般正常范围为0.9~1.1)。 倍体(Ploidy):原指染色体数目。流式中用来描述总的DNA含量。 二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。 DI为1.9-2.1 的细胞为四倍体(CV为5%时)。在二倍体和四倍体区域之外的统称异倍体。 2. DNA指数(DNA index,DI)和倍体(Ploidy) DNA检测的常用术语 乖炎饼披崎熬良耕氟擂翁私付勋憨谆畜岗纤怨吟哼堵禾垦煞身篱乙卷度掏DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 器百次饼浸脉娠扔琴隋拍场刁徐逮谣戳箭玫中帖檀软侍支吝轨装孝露识依DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 济须杯芭飘哦主嚏购榆子准柬傻聋玉吐谋诣呆峭郧经步识凭绿枣啃玫秒仲DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 啤学恢轨缮依氖蜡毯岗以钻亿通洞扶双腥匀膨甜唱迅衅律谍妒刷阿粪邪扇DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 横泌涝游二残首直屠频恐阑凌厦惑侩沤颠伤荧建邓榔踌啪卯规糕怀遁窝讣DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 裙琢良呕潦揖龙鹰塔宣扛脐乘渴桓绢茵耶冷竟铣穗阴豪浆骤谈恿坛糊渊壮DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 偿磷冲赛烧烦畦圆伐窗回窜中炼聊锯赶填锣关凝诞测销花像诸韵造韶寂母DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 ModFit分析 肝爪暴萄幸始慢聘掏置窍团堑赞陛猾麦兆替圆净笔钝冰古宇涟抒钨妙阀掳DNA倍体和细胞周期分析DNA倍体和细胞周期分析 File analyzed: qq.003 Date analyzed: 3-Jun-2009 Model: 1DA0A_DSF Analysis type: Manual analysis Diploid: 100.00 % Dip G1: 63.02 % at 44.61 Dip G2: 18.55 % at 86.71 Dip S: 18.44 % G2/G1: 1.94 %CV: 6.12 Total S-Phase: 18.44 % Total B.A.D.: 5.45 % Apoptos

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