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名词解释1 DNS试剂:3,5-二硝基水杨酸试剂,与还原糖共热后被还原成棕黑色的化合物2 Km:米氏常数，是酶的一个特征常数大小反映了酶与底物亲和力的强弱。 Vmax：是酶被底物饱和时的反应速度，Km值的物理意义为反应达到1/2Vmax的底物浓度再增加底物对反应速度没有什么影响。反应速度逐渐趋近的恒定值称为最大反应速度Vmax。3 还原糖：是指含有自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的蛋汤和某些二糖（如乳糖和麦芽糖）。4 gel filtration:凝胶层析法，是利用凝胶吧分子大小不同的物质分离开的一种方法，又叫做分子筛层析法，排阻层析法。5 Acr：丙烯酰胺，可与少量的交联剂甲叉双丙烯酰胺（Bis），在催化剂的作用下聚合交联而成三维网状的聚丙烯酰胺凝胶。6 酶的比活力：在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的/view/81957.htm \t _blank酶活力单位数。7 酶的活力单位: 是指在特定条件下(25℃、最适的pH值和底物浓度),每分钟可催化1微摩尔底物转化所需要的酶量。8 电泳：带电粒子在直流电场中向着 所带电性相反的电极移动的现象。9 层析（色谱）：用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，使混合物各组分以不同速度移动，从而达到分离的一种物理方法。10 分子筛效应：凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小“排队,凝胶表现分子筛效应。11 电泳的原理：电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。12 凝胶过滤层析的原理：一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。凝胶过滤层析具有分子筛效应13 按层析过程的机理，层析法分哪几类？按操作形式不同又分哪三类？：根据分离的原理不同分类，层析主要可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。按操作形式不同又分层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。14 可见分光光度计的使用注意事项？：（1） 使用过程中比色皿的四个面在槽中保持一定的位置,取用比色皿时手应该捏住四个棱而不能碰到面。比色皿应该避免磨损透光面。（2） 使用过程中不得打开盖子，保持仪器清洁,为避免溶液洒落对仪器造成的腐蚀，所有溶液的配置、倾倒都不要在仪器附近操作。比色皿放进样品池之前必须把外表面擦干。（3）当（仅当）操作者错误操作或其他干扰引起微机错误时，应该立即关断主机电源，重新启动，但无须关断灯源电源。（4）光学器件和仪器运行环境需保护清洁。清洁仪器外表时 ,请勿使用乙醇乙醚等有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩。15 蛋白质含量测定的常用方法有那些？：（1）微量凯式定氮法。（2）双缩脲法。（3）folin－酚试剂法。（4）紫外分光光度法。（5）考马斯亮蓝染色法。16 双倒数法测定米氏常数的基本原理：　Lineweaver和Burk将米氏方程改写成倒数形式：17 聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N，N甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。电渗作用比较小，不易和样品相互作用。 ②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质，在聚合前可调节单体的浓度比，形成 不同程度交链结构，其空隙度可在一个较广的范围内变化，可以根据要分离物质分子 的大小，选择合适的凝胶成分，使之既有适宜的空隙度，又有比较好的机械性质。③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明，易观察，可用检测仪直接测定。 ④丙烯酰胺是比较纯的化合物，可以精制，减少污染。18 如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？（6分）：（1）用定糖法检测。（2）用紫外分光光度计检测。（3）用琼脂糖凝胶电泳检测。等19 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝8.3，那么样品应点在哪端？为什么？（6分）：样品应点在负极端，因为电泳缓冲液PH＝8.3，在这样的环境中，血清蛋白的几种蛋白质电离后都带上负电荷，所以只有点样在负极端，外加电压后，才能向正极移动，彼此才能分开。20 凝胶电泳的一般操作步骤（11分）：制胶，加入电泳缓冲液，加样，电泳，剥胶，染色，脱色。21 要配制500ml 0.01mol/L的NaOH溶液应如何配制？（10