分析性能评估资料符合性研究.docVIP

分析性能评估资料（四） 4. HPV各亚型的符合性研究 4.1 HPV各亚型的符合性研究 4.1.1 实验的基本参数 文件号 BMT-TF-SFDA-01-R0 实验名称 HPV各亚型的符合性研究 实验目的 用于评价分析BMT HPV 分型9G膜试剂盒的符合性试验 操作者 （签名） 确认人 （签名） 开始日期（年/月/日） 结束日期（年/月/日） 试验地点 BMT 2-2-2 温度 湿度 使用的材料/样本 使用HPV 16, 18, 31, 33, 45, 26, 35, 39, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 69, 70, 73, 6,10, 的标准物质和10mM Tris 缓冲液（阴性） 产品编号 产品名称 质控号 BMT HPV1 分型9G膜试纸条 BMT HPV2 分型9G膜试纸条 杂交缓冲液 HC Cy5-DNA 冲洗缓冲液 10mM Tris缓冲液（pH8.0） PCR预混合物 BMT HPV引物组 保存原始文档的文件夹名称 \HPV各型的符合性研究 ② 保存原始文档的文件夹名称 原始文件名 4.1.2 实验方法 1) 材料准备 在设定的有效期内使用已经过Nanodrop定量检测的确定浓度的DNA作为测试标本。 该测试样本是由韩国食品与药品管理局分配的国家标准品HPV L1 DNA（人乳头瘤病毒L1 DNA, 代码08/023）。使用的标本见下表。 使用的材料/样本 样本：HPV L1 DNA（人乳头瘤病毒L1 DNA，代码08/023） HPV亚型 管理编号 标准物质的浓度 HPV亚型 管理编号 标准物质的浓度 HPV 16 HPV-16-KFDA 1.0x102 拷贝 HPV 56 HPV-56-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 18 HPV-18-KFDA 1.0x102拷贝 HPV 58 HPV-58-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 31 HPV-31-KFDA 1.0x102拷贝 HPV 59 HPV-59-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 33 HPV-33-KFDA 1.0x102拷贝 HPV 66 HPV-66-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 45 HPV-45-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 68 HPV-68-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 26 HPV-26-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 69 HPV-69-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 35 HPV-35-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 70 HPV-70-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 39 HPV-39-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 73 HPV-73-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 51 HPV-51-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 06 HPV-06-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 52 HPV-52-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 10 HPV-11-KFDA 1.0x103拷贝 HPV 53 HPV-53-KFDA 1.0x103拷贝 阴性对照 10mM tris buffer 2) 实验过程 BMT HPV 9G膜试剂盒对HPV各亚型符合性实验操作步骤如下。 a）准备好HPV16, 18, 31, 33, 45, 26, 35, 39, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68，69, 70, 73，6，10的标准物质和10mM tris缓冲液（阴性）； b）按照用户手册中PCR法（2-2）操作，以上述DNA为模板进行PCR扩增； c）然后，按照用户手册中杂交法（2-3）步骤在试纸条上进行杂交，再按照用户手册中的冲洗方法（2-4）进行冲洗； d）使用BMT 1D扫描仪TM扫描试纸条并分析结果； e）若HPV检测显示“HPV Positive”，同时HPV 16, 18, 45, 31, 33低于300时，将剩下的第一次杂交溶液（110 ul）加至HPV2 试纸条（可选）的“样本端口”，以取得进一步的基因分型结果。 4.1.3 结论 HPV亚型 实验次数 第一次 第二次 第三次 HPV 16 HPV 16 HPV 16 HPV 16 HPV 18 HPV 18 HPV 18 HPV 18 HPV 31 HPV 31 HP