各类流式软件介绍-流式细胞术论坛.docVIP

细胞分析术半月快讯 第34期 1……. 第22届临床流式细胞术年会摘要 2…….细胞分析术最新文献及动态摘要 第22届临床流式细胞术年会摘要 流式细胞仪检测ALL缓解患者MRD的重要预后意义 微小残留疾病(MRD)可以预测急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗初期的治疗结果。流式细胞术(FCM)检测MRD是建立在异常抗原表达模式上的。我们对FCM检测ALL患者体内的MRD的预期可行性进行了评估。47个被重新诊断出的或复发的或异常免疫表型表达的ALL患者都得到了缓解。利用三色或四色抗体组合试剂在FACScan或FACSCanto流式细胞仪上对MRD做了分析。根据MRD含量的不同(0.1%、0.1%MRD1.0%、1.0%)，将患者分为三组。 抗原表达异常的频率分别如下：CD13(42.6%)、CD13/CD33 (27.7%)、CD33 (10.6%)、其他(19.1%)。根据MRD，患者分别被归为10个高残留组，25个中残留组，12个低残留组。在这三组中，复发率和死亡率没有差别(分别为p=0.16和p=0.39). 低残留组的总存活期(OS)和未复发存活期(RFS)比高残留组的长(OS,平均数(月)16.0比10.9，p=0.72,RFS,平均数(月)16.0比9.9，p=0.28)。这种差别在MRD为1%左右的两组患者中更为明显(OS,P=0.54,RFS,P=0.11). 在这次研究中，MRD高水平表达的ALL患者的幸存期很短。用流式检测ALL患者中的MRD对术后诊断很有帮助，尤其是在白血病淋巴细胞和反应性淋巴细胞很难区分的时候。 使用CD34和P53免疫组化染色来鉴别诊断MDS和再障 骨髓(BM)细胞增生明显不良是区分MDS和再障的重要依据。有时候，稀释的骨髓抽刺物很难鉴别发育不良的变化以及细胞生成性异常。我们对CD34，P53，HbF的免疫反应性区别MDS和AA的有效性进行了评估。从64个个体(30个MDS,34个AA)和7个确定性患者(2个缺铁性贫血，2个先天性血小板缺少性紫癜和3个骨髓无关性淋巴瘤患者)中获取骨髓凝块或活组织切片样本。根据预想的检测方法对CD34，P53，HbF进行染色。骨髓有核细胞被着色的数量达到10HPF。我们对免疫组织化学染色法，CBC，骨髓研究，PNH测试，染色体检测和总体存活期测试的结果进行了比较。在MDS患者体内，未成熟细胞增加而淋巴细胞减少(分别是p=0.047,p=0.023)。MDS患者体内出现了红细胞，粒细胞和巨核细胞的异常(分别为p0.0001,p0.0001,p=0.002)，阳性成高铁红细胞(p0.001),未成熟细胞的异常定位增强(p=0.011)。MDS患者体内的染色体异常比AA患者明显(p=0.006)。MDS体内CD34及P53阳性骨髓细胞比AA患者多(p=0.002,p0.001) 。HbF阳性骨髓细胞的数量没有差异。这项实验结果再次证明发育异常和染色体异常在区分MDS和AA的重要性。骨髓凝块或活组织切片的CD34和P53染色方法也为区分MDS和AA提供了有用的参考信息。 流式细胞仪标准化的基本原理 为了保证合理的噪音信号和结果的长期可比性，有必要用一种标准的方法对流式细胞仪的计量进行校准，这种方法适用于校准每台流式细胞仪的工作性能。通过定义明确的操作参量来建立系统平台间清除数据信息的标准化形式从而来表现系统是怎样运行的。仪器性能主要由以下三个参数决定：精确度、线性度和灵敏度。仪器校准或流体动力学校准是检验精确度的基本方法，即让鞘液自由流动穿过流动室而不引起波动，如果有波动则可能是细胞内有蛋白残留。在经过适当清洁和校准的仪器中，检测相同大小的荧光微球时会因为仪器本身产生CV值很小的正态分布峰，在做DNA测定时这一点尤为重要。线性度是补偿调节和定量测量的基础，可以利用两种荧光强度不同的微球进行评估。灵敏度是测定系统分离两种弱荧光群体能力的指标。把内在CVs相似的已知了MESF的两种弱荧光微球和一种强荧光微球作为一个组合来校准其灵敏度。日常的标准化操作采用了到这些方法后就可以对每台流式细胞仪系统进行独特监控。 4，在部分原发性DLBCL和继发性囊泡淋巴瘤患者的异常浆细胞缺失表达成熟B细胞表型 t(8;14)是Burkitt淋巴瘤细胞异常的标志，在一些囊泡淋巴瘤和DLBCL的案例中也作为细胞异常的额外指标。在B-ALL患者中，cMYC转移也被考虑在内。在这里我们描述了7个和我们这次研究相关的案例，在他们的GC肿瘤中出现了未曾预料到的现象。肿瘤细胞出现淋巴细胞样形态，